Микробиологическое исследование мочи на микрофлору


Посев мочи на микрофлору с идентификацией микроорганизмов, в т.ч. кандида и определением чувствительности к основному спектру антибиотиков и антимикотиков

Лабораторный посев мочи на флору — популярный и эффективный метод микробиологического исследования. Он позволяет диагностировать патологические, инфекционные и воспалительные процессы в организме на ранних стадиях. Анализ мочи на микрофлору определяет вид микроорганизмов — они бывают условно-патогенные и патогенные, также определяется и их концентрация в образце биоматериала.

Показания к анализу мочи на флору

Основными симптомами, сигнализирующими о необходимости сдать мочу на флору, являются:

  • боли в области живота и в поясничной зоне;
  • нарушение процесса мочеиспускания — оно может быть слишком частым или, наоборот, редким;
  • боль и жжение при мочеиспускании;
  • появление примесей в моче, ее мутность и изменение цвета.

Обнаружение аэробной микрофлоры в моче эффективно для определения чувствительности этих микроорганизмов к антимикотикам и антибиотикам. Это исследование применяется при диагностике кандидоза, цистита, уретрита, а также при заболеваниях почек.

Сдать образец мочи на бакпосев патогенной флоры с расшифровкой можно в наших центрах. Уточняйте детали подготовки к анализу по номеру телефона, указанному на сайте.

Пример выдачи результата:

Бак посев мочи - бактериологический посев мочи на флору. Анализ мочи на стерильность.

Бактериологический посев мочи (бакпосев мочи) - вид бактериологического исследования, при котором выявляются и идентифицируются микроорганизмы (чаще всего это бактерии), находящиеся в моче, определяется их концентрация. С этой целью биологический материал (моча) помещается в благоприятную для роста и развития бактерий питательную среду (агар, сахарный бульон). Если рост микроорганизмов отсутствует, то результат отрицателен. Если рост бактерий или других микроорганизмов (например, грибков) все же выявлен в такой концентрации, при которой возможно развитие инфекции, то результат бакпосева мочи считается положительным.

Концентрация (количество микроорганизмов в единице объема биоматериала) при бакпосеве мочи определяется в колониеобразующих единицах (КОЕ). Колониеобразующая единица (colony-forming unit - CFU) - одна живая микробная клетка (или группа клеток), из которой вырастает видимая колония микроорганизмов.

В случае положительного результата бакпосева мочи - идентификации выявленного возбудителя инфекции необходимо выбрать эффективный для борьбы с ним антибактериальный препарат (антибиотик). Для этого проводится определение чувствительности к антибиотикам выделенных культур микроорганизмов (антибиотикограмма). Определение чувствительности к антибиотикам исключительно важно при назначении рациональной антибактериальной терапии.

Бактериологический посев мочи (бакпосев мочи) - довольно распространенное исследование, обладающее высокой чувствительностью и специфичностью. Широко применяется анализ на бакпосев при беременности. Серьезным преимуществом является высокая точность полученных результатов.

Анализ мочи на бакпосев (бакпосев мочи) также показан для определения эффективности проводимого лечения инфекций мочевыводящей системы.

Недостатками метода (преимущественно техническими) являются относительная длительность исследования и высокие требования к забору материала. Однако с помощью бакпосева мочи можно получить информацию, которую не могут дать другие методы исследований.

Показания к проведению бакпосева мочи:

  • инфекции мочевыводящей системы,
  • контроль проведенного лечения,
  • уточнение диагноза при нетипичной картине заболевания,
  • рецидивирующее течение заболевания,
  • беременность,
  • сахарный диабет,
  • иммунодефицит,
  • подозрение на резистентную (устойчивую к антибактериальной терапии) флору.

На бакпосев мочи берется средняя утренняя порция мочи в количестве 3-5 мл, собранная в стерильный пластиковый одноразовый контейнер. Контейнер для сбора мочи на бактериологический посев следует заранее получить в регистратуре лаборатории CMD. Сбор мочи для сдачи анализа на бакпосев мочи осуществляется после тщательного туалета наружных половых органов без применения антисептиков.

Биоматериал для исследования бакпосева мочи берется до начала антибактериальной терапии или в интервалах между курсами лечения, но не ранее двух недель после ее окончания.

Собранную мочу необходимо доставить в Лабораторию как можно быстрее: при комнатной температуре (+18+20°С) – в течение 1-2 часов; при +4+8°С (холодильная камера) - 5-6 часов.

Посев мочи на микрофлору с идентификацией микроорганизмов, в т.ч. кандида и определением чувствительности к расширенному спектру антибиотиков и антимикотиков

Для лабораторной диагностики таких инфекционных заболеваний органов мочеполовой системы, как уретрит, цистит и кандидоз, нет более простого и надежного варианта, нежели сдать бак анализ мочи.

Этот вид исследования дает возможность выявить в моче наличие патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, а также определить их концентрацию и количественное соотношение. Это необходимо для постановки врачом правильного диагноза. К тому же, посев на бактерии в моче позволяет определить их степень чувствительности к антимикотическим препаратам и антибиотикам.

Микробиологическое исследование мочи: цена анализа и показания к нему

Сделать бактериологический анализ мочи в лаборатории рекомендуется при наличии таких симптомов, как:

  • изменение цвета мочи;
  • болезненные ощущения при мочеиспускании;
  • сильный зуд и жжение в области наружных половых органов;
  • появление выделений с неприятным запахом и нехарактерным цветом.

Стоимость анализа на посев мочив наших центрах максимально доступна. Вы можете сдать мочу на данное исследование в удобное для вас время, оформив предварительно заказ.

Пример выдачи результата:

Посев мочи на флору: как сдавать и нормы

Посев на флору и восприимчивость антибиотиков – исследование, которое позволяет выявить степень инфицирования органов мочеполовой системы.

Общая информация

Посев мочи на флору представляет собой анализ по методу микробиологического исследования мочи под микроскопом. Его принято собирать при диагностированных воспалительных заболеваниях с подозрением на инфекционную природу. Суть посева мочи на флору заключена в выявлении микроорганизмов и установлении четкой связи их присутствия с развитием болезни. Изучению подвергаются:

  • Виды выявленных бактерий, микробов и другой микрофлоры;
  • Концентрация их по отношению к общему объему жидкости;
  • Восприимчивость выделенных микроорганизмов к воздействию антибиотиков.

Последний пункт актуален если выявлены микроорганизмы с патогенными свойствами.

Бак посев мочи при воспалениях мочеполовых органов чаще всего обнаруживает:

  • Стрептококки;
  • Стафилококки;
  • Coli – эшерихии;
  • Протей;
  • Клебсиеллы;
  • Энтерококки;
  • Кандиды.

Бак посев мочи на флору, как промежуточную процедуру контроля терапии, проводят только на 5-7 день с момента последнего приема антибиотиков.

Анализ мочи общий лабораторный, а также бак посев – процедуры, которым нет альтернативы при диагностировании инфекций мочеточников, а особенно мочевого пузыря. В нормальной ситуации весь тракт мочевыделения, от почек и до уретры, не содержит бактерии – моча стерильна. Если все – же, в ней выявляется некоторое количество микроорганизмов, это можно объясниться их попаданием в урину с наружных половых органов. Нередко наружная микрофлора проникает также в уретру, поэтому исследование, практически всегда, показывает положительный результат. Однако это вовсе не говорит о каком-либо заболевании. Если же обнаруживают опасное количество микроорганизмов, говорят о бактериурии. Один из явных признаков бактериурии – явное преобладание в урине какого-то одного вида бактерий, если же видов несколько то, вероятно, произошло засорение образца внешней инфекцией с кожи. В связи с этим, довольно часто, проводят повторное исследование для уверенности в корректности его результатов. Подсчет количества микроорганизмов принято проводить в пробе мочи объемом 1 мл.

В особых ситуациях, если есть сомнения в результатах анализа серединной пробы мочи, и при невозможности определить клиническую картину болезни четко и однозначно, прибегают к взятию пробы урины путем надлобковой пункции. Такой метод применяют также при обнаружении полимикробного заражения.

Видео по теме

Технология отбора пробы мочи для бактериологического анализа

Главное условие достоверного результата – стерильность образца, поэтому следует серьезно отнестись к правилам подготовки образца исследования:

  • Емкость должна быть стерильной и плотно закрывающейся;
  • Перед сдачей пробы, пациент должен провести туалет наружных половых органов, и дезинфекцию наружных тканей уретры. Это можно сделать теплой водой без антибактериальных средств.
  • Для анализа нужна серединная порция мочи – сначала, на протяжении пары секунд спускают мочу в унитаз, и только затем, набирают необходимое количество для бака посева;
  • Набрав нужный объем жидкости, контейнер плотно закрывают, избегая при этом касания пальцами внутренних ее стенок и, отправляют в лабораторию.

Для этого исследования принято брать утреннюю мочу, но можно брать пробу и на протяжении дня. В этом случае обязательно соблюдать правило – брать мочу на анализ можно не ранее, чем через два, три часа с момента предыдущего мочеиспускания. Достаточной, считается порция мочи от 5 до 10 мл.

Если есть подозрения на туберкулез, анализ проводят утром на протяжении трех дней кряду.

Если у пациента стоит катетер, медработник проводит его перекрывание путем зажимания пинцетом, затем стерилизацию медицинским спиртом и с помощью иглы проводят отбор нужного количества мочи (4 мл) для бак посева, после чего, сливают в контейнер и отправляют в лабораторию.

Обязательно проследите, чтобы на бланке, сопровождающем пробу, помимо фамилии и имени, были указаны – время отбора пробы, метод, который при этом использовали, а также предполагаемый диагноз и данные о принимаемом лечении.

Референтные показатели

Уровень развития бактериурии определяют по показателю КОЭ – количество образующих бактериальные колонии единиц на один мл жидкости.

Согласно мнению авторитетных микробиологов, результаты бак посева мочи трактуют так:

  • Этиологически значимым, выявленный возбудитель, считается, даже, если не наблюдаются четкие клинические симптомы заражения мочеточных путей при показателях КОЕ более 10 5 на мл исследуемой жидкости. Это относится как к монокультуре, так и к титру;
  • При явно выраженных симптомах цистита, уретрита и инфекционного поражения мочевых путей, особенно верхних его отделов КОЕ считаются этиологически значимым при его показателях от 10 2 на 1 мл. Это же относится к ситуациям исследования во время антимикробного курса процедур;
  • Выявление двух микроорганизмов при инфекционных процессах мочевыводящих путей при условии хронического их протекания, этиологически значимыми принимают значения КОЕ более 10 5 на 1 мл если выделенные микроорганизмы не принадлежат к группе контаминантов;
  • Исследование проводят повторно, если выделены 2 и более видов микроорганизмов – КОЕ в титрах 10 4 на 1 мл. Такие показатели могут быть вследствие засорения пробы сторонней микрофлорой.

Альтернативные методы исследования оценивают 10 -10 КОЕ одного вида как бактериурию или высокую ее вероятность, а КОЕ менее 10 3 на мл принимают за ложноположительный результат, говорящий о загрязнение пробы. Для женщин значения КОЕ 10 2 на 1 мл принимают значимым свидетельством бактериурии, при условии дизурического синдрома острого характера.

Касаемо достоверности полученных результатов исследования одной пробы, статистика показывает – при соблюдении правил отбора пробы для анализа, такая вероятность для женщин около 80% и приближающаяся к 100% у мужчин. Бак посев, проведенный два-три раза, существенно увеличивает степень достоверности результата, вплотную приближая ее к 100%.

Ложноположительные результаты – что этому способствует?

Основные ошибки, приводящие к недостоверным результатам:

  • Игнорирование правил подготовки к анализу и отбора пробы;
  • Игнорирование влияния медикаментозной антимикробной терапии, если таковая имеет место;
  • Несоблюдение правил хранения образца и несвоевременная его доставка в лабораторию. Длительное, более 1 – 2 часов хранение мочи в теплом месте, приводит к активному размножению комменсалов и скудному росту патогенов, что кардинально искажает результаты исследования.

Цель назначения бак посева

Посев мочи на флору проводят для определения вида микроорганизмов, степени их размножения и выбора препаратов для борьбы с ними. Такие исследования применяют также для контроля обсемененности урины после проведенной катетеризации.

Видео по теме

Микробиологическое исследование мочи

Определение и показатели лабораторного исследования мочи

Определение 1

Моча - это биологическая жидкость, являющаяся конечным продуктом жизнедеятельности организма, которая образуется в почках путем фильтрации крови. Значение процесса образования мочи заключается в удалении из организма конечных продуктов обмена веществ, избытка воды и различных солей, а также избытка некоторых гормонов, ферментов и витаминов.

Основные показатели лабораторного исследования мочи:

  1. Физические свойства (количество суточное и разовое, цвет, запах, относительная плотность, прозрачность).
  2. Химические свойства (реакция мочи (рН), качественное и количественное присутствие белка, присутствие глюкозы (следы или глюкозурия), кетоновых тел, желчных пигментов (билирубина, уробилиногена), амилазы, порфиринов).
  3. Показатели микроскопического исследования осадка. К ним относятся организованный осадок, представленный эпителиальными клетками (круглыми, полигональными, зернистыми), эритроцитами, лейкоцитами, цилиндрами (гиалиновыми, зернистыми, восковидными, эритроцитарными, лейкоцитарными, эпителиальными, грибами, бактериями), и неорганический (неорганизованный) осадок – мочевая кислота, оксалаты, фосфаты и другие соли).
  4. Показатели микробиологического исследования (качественное и количественное определение различных микроорганизмов в моче, их чувствительность к лекарственным препаратам).

Готовые работы на аналогичную тему

Получить выполненную работу или консультацию специалиста по вашему учебному проекту Узнать стоимость

Микробиологическое исследование мочи

Суть микробиологического исследования мочи заключается в обнаружении (или подтверждении отсутствия) в моче условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, способных вызывать воспалительные заболевания мочевыводящих путей, и в случае их обнаружения – количественное и качественное определение возбудителя.

В норме моча человека является стерильной, однако, во время прохождения через мочеиспускательный канал может происходить контаминация ее незначительным количеством резидентной микрофлорой передних отделов канала, например, Enterococcus faecalis, St.epidermidis, E.coli и другими представителями условно-патогенных микроорганизмов семейства Enterobactriaceae и родов Corynebacterium, Lactobacterium и др.

Обнаружение в моче таких возбудителей как Ps.aeruginosa, Kl.pneumoniae, Pr.mirabilis, S. aureus, Serratia, Citrobacter, Mycoplasma, Str. pyogenes, S. Saprophyticus обычно свидетельствует о наличии в органах мочеиспускания вызванного ими воспалительного процесса. Также в пользу этого может свидетельствовать обнаружение в диагностически значимых количествах условно-патогенных представителей микроорганизмов E.faecalis и E.coli, реже - S. Epidermidis.

Показания к назначению микробиологического исследования мочи:

  • различные гнойно-воспалительные заболевания мочевыводящих путей в целях диагностики возбудителя, определения его чувствительности и резистентности к различным антибактериальным препаратам для назначения правильного лечения, а также для дальнейшего контроля эффективности проведенной лекарственной терапии;
  • подозрения на различные системные заболевания;
  • лихорадка неясного генеза.

Методика забора мочи для проведения микробиологического исследования

Для анализа используется утренняя средняя порция мочи, которая собирается в стеклянную стерильную посуду непосредственно во время мочеиспускания, в количестве 5-10 мл.

Женщинам перед этим необходимо подмыться, а у мужчин следует обмыть окружность мочеиспускательного канала, чтобы избежать ложноположительного результата.

Иногда забор мочи может производиться с помощью мочевого катетера. Такой способ используется в тех случаях, когда нужно определить точную локализацию инфекционного процесса (мочевой пузырь или почки).

Для этого мочевой пузырь опорожняют, затем промывают его раствором антибиотика и далее отбирают пробы мочи трижды с интервалом в 10 минут.

Каждая порция отобранного материала немедленно (не более 1 часа) должна направляться в лабораторию.

Если возбудитель обнаруживается во всех трех порциях мочи (иногда его количество даже может возрастать), это означает, что воспалительный процесс локализован в почках, если же рост отсутствует, значит, очаг инфекции находится в мочевом пузыре.

Методика микробиологического исследования

При проведении микробиологического исследования мочи с целью определения возбудителя инфекционного процесса необходимо, чтобы моча была забрана перед началом антибактериальной терапии, так как их применение быстро оказывает влияние на титр (количество) бактерий в сторону снижения, вследствие чего результаты анализа будут неинформативными.

Для обнаружения в моче микроорганизмов в лаборатории проводится ее бактериологический посев.

Для этого необходимый объем мочи размещается на культуральной плотной среде в чашке Петри, которая содержит все нужные для роста бактерий компоненты.

Затем чашку Петри закрывают и помещают в термостат на 24 часа при температуре 37°C, что является оптимальной температурной отметкой для роста бактерий.

Рост любых бактерий на поверхности плотной культуральной среды проявляется в виде образования их колоний.

Каждая колония представлена огромным количеством бактерий, которые произошли от одной бактериальной клетки, находившейся в моче.

Таким образом по количеству колоний на культуральной среде определяют количество содержавшихся в образце мочи микробных клеток.

Если же колонии не образуются совсем или количество их небольшое, значит, моча является стерильной или находящиеся в ней бактерии занесены из нижних отделов уретры.

В случае роста большого количества колоний, можно определить чувствительность возбудителя к различным антибиотикам для выбора рационального лечения.

Для этого колонии бактерий пересевают на культуральные среды, содержащие различные антибиотики.

Далее после инкубации их осматривают. Если отмечается значительный рост колоний, значит, бактерии к данному препарату устойчивы (резистентны).

Если же рост колоний отсутствует, значит, к данному антибиотику бактерии чувствительны.

Для оценки эффективности назначенной антибактериальной терапии повторное микробиологическое исследование мочи проводят через 1 и далее еще через 4 недели после окончания приема препарата.

Если в контрольном посеве мочи возбудитель не дает роста колоний, лечение считается эффективным, а патология - излеченной.

Анализ мочи - посев мочи на аэробную и факультативно-анаэробную бактериальную флору с определением чувствительности к основному спектру антимикробных препаратов

Моча - это биологическая жидкость, за образование и выведение которой отвечает мочевыделительная система. Именно моча помогает организму избавляться от токсинов, выводит продукты жизнедеятельности, соли и ряд веществ, присутствие которых в организме может стать причиной воспалительных процессов. Поэтому состав мочи всегда является подсказкой для оценки правильности функционирования всех систем и органов. В зависимости от того или иного заболевания, в моче могут появляться нетипичные составляющие, меняется ее цвет, запах, могут появиться примеси, а сама жидкость станет мутной, потеряет прозрачность.

В диагностике различных заболеваний обязательно используют несколько анализов мочи. Самый распространенный - общий анализ мочи. Он отражает ряд показателей, в том числе лейкоциты и бактерии. Эти два показатели являются признаком инфекции мочевыводящих путей. Но так как общий анализ мочи не указывает вид бактерий, которые вызвали воспаление, в качестве дополнительной диагностики выбирают посев мочи на флору с определением чувствительности к антибиотикам.

Данный метод исследования является крайне важным для правильного подбора терапии. Ведь назначение антимикробных препаратов в случаях обнаружения бактерий в моче проводится только с учетом их чувствительности. Более того, анализ позволяет оценить не только вид бактерий, но и их количество, а это необходимо в дальнейшем для оценки эффективности лечения.

Посев мочи на флору заключается в переносе некоторого количества мочи на специальную среду для роста бактерий. Конечно, изначально неизвестно, насколько обсеменена моча микроорганизмами. Возможно, что она стерильная, и в таком случае роста не будет. Но если в моче имеются бактерии, то именно состав среды и условия, в которых она будет находиться, являются наиболее благоприятными для их роста. Для проведения анализа требуется определенное время. Среда с бактериями в течение 5-7 дней находится в специальном термостате. В течение этого времени происходит рост бактерий, который можно будет оценить детально, а именно узнать, сколько колоний разных видов бактерий выросло, к каким антибактериальным препаратам чувствителен каждый из них. О том, что анализ требует некоторого времени, пациента обычно предупреждают заранее. Если ситуация требует немедленного назначения терапии, то врач выбирает антимикробный препарат широкого спектра действия, а при получении результатов посева мочи сможет скорректировать лечение, если это потребуется.

Анализ мочи, крови, мокроты на чувствительность к антибиотикам

Собранный биологический материал в стерильных условиях доставляется в лабораторию, где проводятся дальнейшие исследования. В первую очередь его первичный посев производится на универсальные питательные среды. Также берется часть материала для микроскопического исследования. Готовится мазок для микроскопии, проводится исследование, с помощью которого можно определить приблизительную картину, предполагающую, какие микроорганизмы присутствуют в образце.Это позволяет подобрать наиболее оптимальную среду для дальнейших исследований и идентификации микроорганизмов. Также на микроскопии могут быть признаки, указывающие на воспаление, онкологический процесс.

В течение нескольких дней в чашке Петри растут колонии микроорганизмов. Затем отбирают несколько колоний, пересекают их на селективные питательные среды, позволяющие определить примерную группу микроорганизмов. Инкубируйте несколько дней в термостате, затем приступайте к идентификации (определению вида микроорганизмов).Идентификация проводится с помощью специальных биохимических и генетических тестов, детерминант. Кроме того, может быть проведено иммунологическое наблюдение.

После выделения основного возбудителя проведите оценку его чувствительности к антибиотикам. Для этого есть несколько способов. Чаще всего используется метод серийного разведения или диско-диффузионный метод. Методы подробно описаны в микробиологических справочниках, методических руководствах и лабораторных стандартах.

Суть дискодиффузионного метода заключается в посеве выявленных на питательную среду микроорганизмов, сверху накладываются специальные диски, пропитанные антибиотиками.В течение нескольких дней урожай инкубируют в термостате, затем измеряют результаты. Оцените степень замедления роста бактерий каждым антибиотиком. Если бактерия чувствительна к антибиотику, вокруг диска образуется «зона лизиса», в которой бактерии не размножаются. Их рост медленный или полностью отсутствует. Диаметр зоны задержки роста определяется степенью чувствительности микроорганизма к антибиотику и формулируются дальнейшие рекомендации.

Метод серийного разбавления является наиболее точным. Для этого микроорганизмы высевают на жидкие питательные среды, добавляют разведенный в системе десятичных разведений антибиотик. После этого пробирки помещают на несколько дней в термостат для инкубации. Чувствительность к антибиотикам определяется степенью роста бактерий в питательном бульоне с добавлением антибиотика. Запишите минимальную концентрацию, при которой рост микроорганизмов еще продолжается. Это минимальная дозировка препарата (необходим пересчет с микробиологических единиц на действующее вещество).

Это стандартные микробиологические методы, лежащие в основе любого исследования. Они подразумевают ручное выполнение всех манипуляций. Сегодня многие лаборатории оснащены специальным оборудованием, которое выполняет все эти процедуры в автоматическом режиме. Специалисту, работающему с таким оборудованием, необходимо только умение работать с оборудованием, соблюдение правил безопасности и стерильность.

Следует учитывать, что показатели чувствительности в лаборатории и в условиях живого организма резко различаются.Поэтому человеку назначают более высокую дозировку, чем было определено в ходе исследования. Это связано с тем, что в организме нет таких оптимальных условий для роста бактерий. В лаборатории созданы «идеальные условия». Часть препарата нейтрализуется действием слюны, желудочного сока. Эта часть нейтрализуется в крови антителами и антитоксинами, которые вырабатываются иммунной системой.

Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам

Для начала собирается биологический материал.Для этого нужно собрать среднюю порцию утренней мочи и доставить ее в лабораторию. Важно соблюдать стерильность и за несколько дней до анализа не принимать антибиотики, иначе можно получить ложноотрицательный результат. После этого производится стандартный урожай, суть которого заключается в выделении чистой культуры возбудителя и подборе антибиотика, который окажет на нее наилучшее бактерицидное действие. Определяется необходимая концентрация антибиотика.

Анализ мочи чаще всего назначают при подозрении на инфекционно-воспалительный процесс в мочеполовой системе, при иммунодефицитах и ​​нарушениях обмена веществ. В норме моча представляет собой стерильную жидкость. Продолжительность такого исследования составляет 1-10 дней и определяется скоростью роста микроорганизма.

Анализ на посев и чувствительность к антибиотикам

Исследование подразумевает выделение микроорганизма, являющегося возбудителем болезни, в чистой культуре.Иногда таких микроорганизмов может быть несколько (смешанная инфекция). Некоторые микроорганизмы способны образовывать биопленки, которые представляют собой своеобразные «микробные сообщества». Выживаемость биопленок намного выше, чем отдельных микроорганизмов или ассоциаций. Кроме того, не все антибиотики способны воздействовать на биопленку и проникать в нее.

Для определения возбудителя, выделения его в чистую культуру проводят посев. В ходе исследования выращивают несколько культур на различных питательных средах. Затем выделяется чистая культура, определяется биологическая значимость и определяется чувствительность к антибактериальным препаратам.Подбирается оптимальная концентрация.

Для исследования может быть использован любой биологический материал, в зависимости от заболевания, локализации инфекционного процесса. Продолжительность определяется скоростью роста микроорганизмов.

[20], [21], [22], [23], [24], [25]

Анализ кала на чувствительность

Кал исследуют на различные заболевания желудка и кишечника, при подозрении на инфекционный процесс, бактериальную интоксикацию, пищевые отравления. Цель исследования - выделить возбудителя и выбрать оптимальные антибактериальные препараты, которые будут иметь высокую активность.Важность данного вида исследования состоит в том, что можно подобрать препарат, который будет воздействовать только на возбудителя болезни, а не на представителей нормальной микрофлоры.

Первый и очень важный этап - это сбор стула. Его необходимо собрать в специальную стерильную емкость в утренние часы. Держать не более 1-2 часов. Женщинам с менструальными выделениями стоит отложить анализ до конца, поскольку точность результатов изменится. Материал доставлен в лабораторию для исследования.Анализ проводится с использованием стандартной микробиологической методики посева и выделения чистой культуры. Дополнительно проводится антибиотикограмма. По заключению разработаны рекомендации, определена схема дальнейших исследований.

[26], [27], [28], [29]

Анализ на дисбактериоз с чувствительностью

Материалом для исследования служат кал, взятые сразу после акта дефекации. Нормальная микрофлора желудочно-кишечного тракта состоит из представителей нормальной флоры и нескольких представителей патогенной флоры.Их видовой состав, количество и соотношение строго обозначены и находятся в пределах допустимой нормы. Если такое соотношение нарушается, развивается дисбактериоз. Он может проявляться по-разному. Инфекционные заболевания могут развиться при резком увеличении количества патогенной микрофлоры. Если количество какого-либо микроорганизма резко уменьшается, то свободное место занимают другие представители, не характерные для желудочно-кишечного тракта или патогенные. Часто свободное место занимает грибок, затем развиваются различные грибковые поражения, кандидоз.

С целью определения количественного и качественного состава микрофлоры кишечника проводится анализ кала на дисбактериоз. Условно все представители кишечника делятся на три группы: патогенные, условно-патогенные и непатогенные. Соответственно, анализ состоит из трех частей. Каждая группа микроорганизмов имеет свои потребности в источнике питания, энергии. Для каждой группы необходимы отдельные питательные среды и селективные добавки.

Сначала проводят микроскопию и первичный посев.После посева отбирают самые крупные колонии, морфологически похожие на представителей каждой группы. Производится путем пересадки на селективные носители. После того, как микроорганизмы вырастут, их идентифицируют и сразу же проверяют на чувствительность к антибиотикам. Используются стандартные микробиологические методы.

Изучение группы патогенных микроорганизмов, помимо стандартных исследований, предполагает выявление бактерий брюшного тифа, паратифов и дизентерии. Также определяется, является ли человек носителем этих микроорганизмов.Комплексное исследование дисбактериоза также включает изучение представителей группы бифидобактерий и лактобактерий. Исследование занимает около недели и зависит от скорости роста микроорганизмов.

[30], [31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38]

Анализ на чувствительность к бактериофагам

При кишечной инфекции для лечения часто используются бактериофаги вместо антибиотиков. Бактериофаги - это вирусы бактерий, которые чувствительны только к ним.Они находят бактерию, с которой они комплементарны, проникают в нее и постепенно разрушают бактериальную клетку. В результате процесс заражения останавливается. Но не все бактерии чувствительны к бактериофагам. Чтобы проверить, проявляет ли этот бактериофаг активность в отношении представителей микрофлоры, необходимо провести анализ.

Материал исследования кал. Анализ необходимо доставить в лабораторию в течение часа, иначе это будет невозможно.Необходимо провести анализ в нескольких повторностях. Оригинальная методика аналогична таковой при определении чувствительности к антибиотикам. Сначала проводится предварительная микроскопия образца, затем первичный посев на универсальные питательные среды. Затем селективная культура производится на селективных питательных средах.

Основная работа ведется с чистой культурой. Их лечат различными видами бактериофагов. Если колония растворяется (лизируется), это свидетельствует о высокой активности бактериофага.Если лизис происходит частичный - бактериофаг функционирует умеренно. При отсутствии лизиса можно говорить об устойчивости к бактериофагу.

Преимущество фаговой терапии в том, что бактериофаги не влияют на организм человека, не вызывают побочного действия. Они прикрепляются к определенным типам бактерий и лизируют их. Недостаток в том, что они очень специфичны и обладают избирательным действием, и не всегда могут прикрепляться к бактериям.

[39], [40], [41], [42], [43], [44], [45], [46], [47]

Анализ мокроты на чувствительность к антибиотикам

Анализ представляет собой исследование отделяемых нижних дыхательных путей.Цель - определить тип микроорганизмов, выступающих возбудителем заболевания. Также проводится антибиотикограмма. В этом случае определяется чувствительность возбудителя к антибиотикам, и подбирается оптимальная концентрация. Применяется при респираторных заболеваниях.

Исследование мокроты и другого содержимого легких и бронхов необходимо для выбора схемы лечения, для дифференциации различных диагнозов. Он используется для подтверждения или опровержения наличия туберкулеза.

Для начала нужно получить биологический материал. Его можно получить при кашле, отхаркивании или извлечении из трахеи при бронхоскопии. Есть специальные аэрозоли, способствующие отхождению мокроты. Перед отбором мокроты следует прополоскать рот водой, что снизит степень бактериального заражения ротовой полости. Сначала рекомендуется сделать 3 глубоких вдоха, чтобы вызвать кашель. Мокроту также можно взять путем аспирации из трахеи. В этом случае в трахею вводится специальный катетер.При бронхоскопии вводится бронхоскоп в полость бронха. В этом случае слизистая оболочка смазывается анестетиком.

Затем материал доставляется в лабораторию для изучения. Посев проводят по стандартной схеме, микроскопия. Затем чистую культуру выделяют, и с ней проводят дальнейшие манипуляции. Ставится антибиотикограмма, позволяющая определить спектр бактериальной чувствительности и подобрать оптимальную дозировку.

При подозрении на туберкулез исследуют утреннюю мокроту в течение трех дней. При тестировании на туберкулез результат будет готов через 3-4 недели. Поскольку микобактерии туберкулеза, являющиеся возбудителем болезни, очень медленно растут.

В норме должны встречаться представители нормальной микрофлоры дыхательных путей. Также необходимо учитывать, что при пониженном иммунитете параметры нормальной микрофлоры могут отличаться.

Анализ чувствительности сперматозоидов к антибиотикам

Это бактериологическое исследование эякулята спермы с дальнейшим подбором чувствительных антибиотиков и их концентраций.Чаще всего его проводят при лечении бесплодия и других заболеваний мужской репродуктивной системы. В том случае, если заболевание сопровождается инфекционным процессом. Основной причиной мужского бесплодия в большинстве случаев является инфекция. Обычно сначала выполняется спермограмма. По результатам определяется оплодотворяющая способность сперматозоидов. Если этот анализ показывает большое количество лейкоцитов, можно говорить о воспалительном процессе. При этом обычно сразу назначают микробиологический анализ, так как воспаление практически всегда сопровождается инфекцией.На основании полученных результатов подбирается соответствующая терапия. Исследование обычно назначает врач-андролог.

Также поводом для сдачи анализа является простатит, венерические заболевания. Назначают и в том случае, если у партнера заболевание, передающееся половым путем.

Правильный анализ основан, прежде всего, на правильном выборе биологического материала. Берут материал в специальные сосуды с широким горлом. Температура хранения должна соответствовать температуре человеческого тела.В этом случае материал можно хранить не более часа. В замороженном виде можно хранить не более суток. Во время приема антибиотиков посев нецелесообразен, это меняет клиническую картину. Обычно урожай сдают до начала курса антибактериальной терапии. Или прекратите прием лекарств за 2-3 дня до обследования.

Затем его высевают на питательную среду. Инкубируйте в термостате 1-2 дня. После выделения чистой культуры проводится идентификация, определяется чувствительность, а также тип и скорость роста каждой колонии.Чувствительность к антибиотикам определяется в случае обнаружения патогенных микроорганизмов. В среднем на анализ делают 5-7 дней.

[48], [49], [50], [51], [52], [53], [54], [55], [56]

Анализ на чувствительность к глютену

Существует множество тестов, с помощью которых вы можете определить иммунологическую чувствительность к различным веществам или патогенам. Раньше основным методом было выполнение тестов, основанных на реакции агглютинации антител и антигенов. Сегодня эти тесты используются все реже, потому что их чувствительность намного ниже, чем у многих современных методик, например, тестов на глютен.Чаще всего на практике прибегают к анализу слюны на клейковину и анализу кала.

Тест на чувствительность к глютену используется для диагностики различных заболеваний кишечника. В его основе лежит реакция иммунной системы. Если в стул добавляется глютен, реакция возникает или отсутствует. Это считается ложноположительным или ложноотрицательным результатом. Положительный указывает на предрасположенность к колиту, высокую вероятность его развития. Также подтверждает целиакию.

Глютен также можно анализировать с использованием слюны в качестве биологического материала.Вы можете измерить количество антител к глиадину. Положительный результат свидетельствует о чувствительности к глютену. Это может указывать на высокую вероятность диабета. Если оба теста дали положительный результат, вы можете подтвердить диабет или целиакию.

[57], [58], [59]

Анализ чувствительности хламидий к антибиотикам

Анализ проводится при лечении инфекционно-воспалительных заболеваний урогенитального тракта, при подозрении на хламидиоз. Материалом для исследования служит соскоб со слизистой оболочки влагалища - у женщин, мазок из уретры - у мужчин.Ограждение в процедурном кабинете выполнено с использованием одноразового оборудования. Важно соблюдать стерильность. Перед приемом материала следует воздержаться от интимной близости в течение 1-2 дней до начала исследования. Если у женщины менструация, материал берется через 3 дня после ее полного прекращения.

Материал доставлен в лабораторию. Полный анализ включает предварительную микроскопию мазка. Это дает возможность визуально определять микрофлору по морфологическим признакам, правильно подбирать питательные среды.Содержание слизи, гноя, частиц эпителия, может прямо или косвенно указывать на развитие воспалительного процесса или злокачественное перерождение клеток.

Затем производится основная культура. Культуру инкубируют в течение нескольких дней под термостатом и идентифицируют по культуре. Затем его производят путем пересадки на селективные питательные среды, предназначенные для выращивания хламидий. Полученные колонии идентифицируют с помощью биохимических тестов. После определения чувствительности к антибиотикам стандартными методами.Выберите наиболее чувствительный антибиотик, его концентрацию. Для выращивания хламидиоза нужны специальные среды, разработанные специально для этого вида микроорганизмов, которые содержат все необходимые вещества и факторы роста.

Также возможно проведение биологического исследования. Для этого заразите возбудителя крыс. В некоторых лабораториях вместо крыс используют специально выращенную культуру тканей. Это связано с тем, что хламидии - внутриклеточные паразиты, и для их выращивания нужны особые условия.Затем микроорганизмы определяют методом ПЦР. Для определения чувствительности производится пересадка на селективную питательную среду для хламидиоза, через несколько дней результаты фиксируются. Об устойчивости или чувствительности судят по подавлению инфекции в клетках.

[60], [61], [62], [63], [64], [65], [66], [67], [68]

Сколько делается тест на чувствительность к антибиотикам?

В среднем анализ делается в течение 5-7 дней. Некоторые тесты делаются дольше.Например, при диагностике туберкулеза результатов следует ожидать от 3 недель до месяца. Все зависит от скорости роста микроорганизмов. Часто сотрудникам лаборатории приходится иметь дело со случаями, когда пациентов просят сделать анализ быстрее. И даже предлагают «доплату» за срочность. Однако здесь необходимо понимать, что от деятельности лаборанта в данном случае ничего не зависит. И это зависит только от того, насколько быстро растет микроорганизм. У каждого вида своя, строго определенная скорость роста.

.

Быстрое обнаружение микробиологических загрязнителей в пробах воды на основе флуоресценции

Микробиологическое загрязнение технологической воды является актуальной проблемой для фармацевтической промышленности. Традиционные методы требуют нескольких дней для получения результатов; поэтому для сокращения времени получения результата широко требуются быстрые микробиологические методы. Milliflex Quantum был разработан для быстрого обнаружения и подсчета микроорганизмов в фильтруемых образцах. Он сочетает в себе мембранную фильтрацию с универсальным флуоресцентным окрашиванием жизнеспособных микроорганизмов.Этот новый альтернативный метод был утвержден с использованием определений Европейской фармакопеи и фармакопеи США со стерильной водой и / или стерильной водой, искусственно загрязненной микроорганизмами. Метод Milliflex Quantum продемонстрировал надежность, надежность, специфичность, точность и линейность во всем диапазоне анализов, соответствующих этим рекомендациям. Перед системой Milliflex Quantum была поставлена ​​задача обнаруживать естественные загрязнители в различных типах очищенной технологической воды для фармацевтических целей. Было продемонстрировано, что Milliflex Quantum точно обнаруживает загрязнения в 3-7 раз быстрее, чем традиционный метод мембранной фильтрации.Процедура окрашивания является неразрушающей, что позволяет проводить последующую идентификацию после положительного результата. Milliflex Quantum предлагает быструю, чувствительную и надежную альтернативу компендиальному методу мембранной фильтрации.

1. Введение

Микробиологическое загрязнение технологической воды является ключевой проблемой для фармацевтической, биотехнологической, пищевой промышленности и производства напитков. Традиционные методы являются эталоном для контроля микробиологического качества воды, поскольку они надежны, просты в использовании и позволяют идентифицировать микроорганизмы.Тем не менее, эти методы трудоемки и трудоемки. Более того, они зависят от способности микроорганизмов образовывать видимые колонии после инкубационного периода, который обычно составляет 3 дня, который может достигать 14 дней (Европейская фармакопея и фармакопея США). Это долгое время до получения результата является проблемой для промышленности, поскольку улучшение процессов и продуктов требует более быстрых методов контроля микробиологического качества. Поэтому за последние 25 лет было разработано множество технологий, позволяющих сократить время получения результата.Эти новые альтернативные быстрые методы должны быть чувствительными, точными и экономичными. Наиболее изученными и используемыми технологиями являются полимеразная цепная реакция (ПЦР), импедиметрия, биолюминесценция, иммуноферментный анализ (ELISA), проточная цитометрия (FCM) и твердофазная цитометрия (SPC) [1–3].

Milliflex Quantum (Millipore, Molsheim, Франция) - это новая система, разработанная для быстрого обнаружения и подсчета микроорганизмов в фильтруемых образцах. Он сочетает в себе мембранную фильтрацию и флуоресцентное окрашивание - две проверенные и широко используемые технологии.Обнаружение основано на универсальном ферментативном флуоресцентном окрашивании жизнеспособных микроорганизмов. Процедура окрашивания является неразрушающей, что позволяет проводить последующую идентификацию после положительного результата.

В этой статье описывается проверка эффективности метода Milliflex Quantum. Исследование было проведено в соответствии с определениями для подтверждения количественной оценки жизнеспособных микроорганизмов в образце из Европейской (глава 5.1.6.) И Соединенных Штатов (глава <1223>) Фармакопеи.Устойчивость, надежность, точность, линейность, диапазон, предел количественного определения, предел обнаружения и специфичность метода оценивались с использованием стерильной воды и / или стерильной воды, искусственно обогащенной микроорганизмами. Метод Milliflex Quantum также использовался для обнаружения естественных загрязнителей в различных типах фармацевтической технологической воды. Все результаты, полученные с помощью метода Milliflex Quantum, сравнивались с традиционным методом мембранной фильтрации.

2. Материалы и методы
2.1. Среда

Предварительно заполненные чашки с триптическим соевым агаром (TSA, Millipore), чашки с R2A (Millipore) и чашки с агаром с декстрозой Сабуро (SDA, Millipore) использовали для стимуляции роста микроорганизмов.

2.2. Штаммы микроорганизмов

Для валидации метода Milliflex Quantum были использованы следующие штаммы Американской коллекции культур (ATCC): Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus brasiliensis ATCC 16404, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, 900ettial Raspberry Pi 27511, Brevundimonas diminuta ATCC 19146, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Bacillus subtilis ATCC 6633 и Escherichia coli ATCC 8739.Экологический изолят Caulobacter sp. также был протестирован с Milliflex Quantum. Культуры поддерживали при -80 ° C в триптическом соевом бульоне (TSB; BioMérieux, Craponne, Франция) с 5% (об. / Об.) Глицерином (Sigma-Aldrich, St. Quentin Fallavier, Франция) в 0,5 ммоль л. -1. буфер HEPES (Sigma-Aldrich).

2.3. Milliflex Quantum Method

Используемая методика описана Baumstummler et al. [4]. Вкратце, образцы фильтровали через мембраны из смешанного эфира целлюлозы, и мембраны помещали на чашки с агаром и инкубировали при температурах, рекомендованных Фармакопеей, или при оптимальных температурах роста.После инкубации мембраны окрашивали в течение 30 мин и помещали в ридер Milliflex Quantum для подсчета флуоресцентных микроколоний. Мембраны повторно инкубировали на чашки со средой и агаром для визуального подсчета колониеобразующих единиц (КОЕ), оценки жизнеспособности и идентификации контаминантов. Параллельно выполнялся компендиальный метод.

Подсчет флуоресценции и количество КОЕ, полученные после повторной инкубации, сравнивали с компендиальным методом. Восстановление флуоресценции и восстановление жизнеспособности рассчитывали следующим образом: = Восстановление флуоресценции (%) Количество флуоресценции = Количество компендиальных методов × 100, восстановление жизнеспособности (%) КОЕ после повторной инкубации Количество компендиальных методов х 100.(1)

Критерий приемлемости для этих параметров был установлен равным или превышающим 70% (Европейская фармакопея, глава 5.1.6. И Фармакопея США, глава <1223>).

2.4. Валидация квантового метода Milliflex
2.4.1. Статистический анализ

Тест Андерсона-Дарлинга или критерий согласия Chi2 использовался для определения того, соответствуют ли данные, полученные с помощью метода Milliflex Quantum и компендиального метода нормальному распределению. При нормальном распределении данных (значение Андерсона-Дарлинга ≥ 0.1; Значение Chi2 ≤ 4,61 для распределения из 5 классов; Значение Chi2 ≤ 2,71 для распределения по 4 классам), для сравнения результатов, полученных с помощью обоих методов, был проведен односторонний дисперсионный анализ (ANOVA), 𝑡-тест Стьюдента для двух выборок или Chi2-тест. Весь статистический анализ проводился с использованием статистического программного обеспечения Minitab (версия 14; Minitab Inc., State College, PA, USA), за исключением теста Goodness-Of-Fit Chi2, который выполнялся с помощью Microsoft Office Excel (версия 2003; Microsoft, Redmond , Вашингтон, США).

2.4.2. Отрицательный контроль

Отрицательный контроль выполняли параллельно с тестированием на микроорганизмы. 100 мл воды с 0,9% NaCl (B. Braun Medical, Boulogne Billancourt, Франция) фильтровали, инкубировали и анализировали в тех же условиях, что и образцы, содержащие микроорганизмы.

2.4.3. Устойчивость времени инкубации

Образцы с добавками фильтровали, и мембраны инкубировали в течение различного времени перед окрашиванием в соответствии с протоколом Milliflex Quantum, как описано ранее.Мембраны повторно инкубировали для оценки жизнеспособности. Использовали условия инкубации, необходимые для микробиологического исследования нестерильных продуктов в главах Европейской (2.6.12 и 2.6.13) и Соединенных Штатов (<61> и <62>) фармакопеи. Восстановление флуоресценции и жизнеспособности определяли по сравнению с компендиальным методом. ANOVA использовался для оценки временного диапазона для стабильного подсчета с помощью Milliflex Quantum.

2.4.4. Прочность

Оценивался эффект от использования различных партий сред, партий мембран, партий реагентов, аналитиков и инструментов. Candida albicans и Ralstonia pickettii , добавленные отдельно в стерильной воде, были обнаружены с использованием двух разных партий мембран или реагентов. Кроме того, прочность среды оценивалась по TSA с Bacillus subtilis и Escherichia coli , по SDA с Candida albicans и по R2A с Ralstonia pickettii . Для каждого испытания на прочность были выполнены два разных испытательных прогона. Каждый запуск тестировался другим аналитиком с разным набором инструментов.Были рассчитаны восстановления флуоресценции и жизнеспособности, и был выполнен дисперсионный анализ, чтобы проверить, не были ли статистические различия в восстановлениях, соответствующих различным тестируемым условиям, (значение 𝑃 ≥ 0,05).

2.4.5. Точность, линейность, диапазон и предел количественного определения

Для каждого зараженного микроорганизма, внесенного в стерильную воду, тесты были выполнены при следующих целевых уровнях пиков на образец: 0 КОЕ, 5 КОЕ, 25 КОЕ, 50 КОЕ, 75 КОЕ и 100 КОЕ. Метод Milliflex Quantum и традиционный метод использовались одновременно.Были рассчитаны восстановления флуоресценции и жизнеспособности, и был проведен-тест Стьюдента для двух выборок, чтобы проверить, не отличаются ли показатели Milliflex Quantum статистически от традиционных подсчетов Milliflex (значение 𝑃 ≥ 0,05).

Линейность, диапазон и предел количественного определения были установлены на основе данных, полученных во время теста точности. Критерии приемлемости для линейности включают значение 2 более 0,95 (Фармакопея США) и наклон линейной регрессии между 0.8 и 1.2.

2.4.6. Предел обнаружения

Микроорганизмы, используемые для проверки точности, были отдельно скорректированы до примерно 3-5 КОЕ на 100 мл до тех пор, пока по меньшей мере 50% образцов не покажут рост в компендиальном методе. Для каждого микроорганизма каждым методом оценивали двадцать повторных образцов. Поскольку цель теста заключалась в том, чтобы продемонстрировать, что метод Milliflex Quantum позволяет обнаруживать 1 КОЕ, метод должен был обнаружить хотя бы один раз 1 КОЕ в течение эксперимента. Кроме того, был проведен-тест Стьюдента для двух выборок, чтобы проверить, не отличается ли счетчик Milliflex Quantum статистически от традиционного счета Milliflex (значение 𝑃 ≥ 0.05). Наконец, эквивалентность доли роста Milliflex Quantum и пропорции традиционного метода была оценена с помощью критерия Chi2 (значение ≥ 0,05).

2.4.7. Специфичность

Специфичность метода Milliflex Quantum была установлена ​​на основе данных, полученных в ходе испытаний на надежность и точность, в которых тестировалась панель микроорганизмов.

2.5. Обнаружение микроорганизмов в фармацевтической технологической воде

Нестерильные пробы воды в процессе производства были взяты на различных этапах процесса очистки воды на 5 фармацевтических заводах.Эти различные типы очищенной воды разбавляли в 100 мл воды с 0,9% NaCl (B. Braun Medical) и фильтровали. Мембраны помещали на планшеты R2A (Millipore) и инкубировали при 32,5 ° C (Общие монографии Европейской фармакопеи: вода для инъекций; вода высокоочищенная; вода очищенная). Было протестировано несколько периодов инкубации для оценки минимального времени инкубации, необходимого для обнаружения флуоресценции. После инкубации мембраны окрашивали в соответствии с протоколом Milliflex Quantum. Мембраны повторно инкубировали на планшеты с R2A (Millipore) для визуального подсчета КОЕ и идентификации загрязнителей.Параллельно выполнялся компендиальный метод. Восстановление флуоресценции и жизнеспособности определяли по сравнению с компендиальным методом.

3. Результаты
3.1. Валидация квантового метода Milliflex
3.1.1. Устойчивость времени инкубации

Устойчивый диапазон времени инкубации, необходимый для обнаружения с помощью Milliflex Quantum, был оценен на 10 микроорганизмах. В таблице 1 приведены полученные результаты. Соответствующее обнаружение микроорганизмов было достигнуто через 22 часа инкубации для Candida albicans и через 28 часов для Aspergillus brasiliensis .Минимальное время инкубации для обнаружения Escherichia coli и Bacillus subtilis составляло 8 и 9 часов соответственно. Экологический изолят Caulobacter sp. был обнаружен через 28 часов. Другим 5 протестированным бактериям потребовалось от 12 до 22 часов инкубации. Метод Milliflex Quantum продемонстрировал надежность в течение нескольких инкубационных периодов для каждого штамма (восстановление флуоресценции и жизнеспособности ≥ 70% и значение ANOVA ≥ 0,05, ≥ = 10). Эти интервалы времени инкубации использовались во время дальнейших испытаний валидации метода.Результаты восстановления во всем протестированном диапазоне времени инкубации, полученные с Aspergillus brasiliensis , представлены в качестве примера на Рисунке 1, который доказывает стабильность результатов и надежность метода в течение 4-часового тестового диапазона.

± стандартное отклонение ) ATCC 12228 Stapure ATCC 6538 Escrow ATCC 8739

Микроорганизм Устойчивый интервал времени инкубации Восстановление флуоресценции ± стандартное отклонение
(%)
ANOVA 𝑃 значение восстановления флуоресценции в пределах устойчивого интервала времени инкубации ANOVA 𝑃 значение восстановления жизнеспособности в устойчивом интервале времени инкубации

Candida albicans ATCC 10231 22 ч – 26 ч 102 ± 38 0.66 101 ± 39 0,75
Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 28–32 часа 99 ± 18 0,71 97 ± 19 0,66 0,66 14–18 часов 98 ± 18 0,20 101 ± 15 0,28
Ralstonia pickettii ATCC 27511 22–26 часов 91 .33 92 ± 26 0,34
Brevundimonas diminuta ATCC 19146 22 ч – 26 ч 112 ± 21 0,78 100 ± 18 0,13 0,13 12–16 часов 128 ± 33 0,06 117 ± 27 0,33
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 16–20 часов 16–20 часов .91 103 ± 24 0,16
Bacillus subtilis ATCC 6633 9 ч – 10 ч 111 ± 23 0,44 102 ± 21 0,4012
8–10 часов 122 ± 29 0,06 111 ± 24 0,44
Caulobacter sp. (экологическая нагрузка) 28–32 часа 90 ± 17 0.16 102 ± 17 0,10

ANOVA, односторонний дисперсионный анализ; ATCC, Американская коллекция типовых культур; SD, стандартное отклонение.

3.1.2. Прочность

Использование различных партий сред, партий мембран и партий реагентов не оказывает значительного влияния на результаты Milliflex Quantum, поскольку результаты ANOVA доказали, что восстановление флуоресценции и жизнеспособности было статистически эквивалентным во всех испытанных условиях (данные не показаны).Воспроизводимость результатов испытаний гарантируется также при использовании разных операторов и комплектов оборудования. Таким образом обеспечивается надежность метода.

3.1.3. Точность, линейность, диапазон и предел количественной оценки

Candida albicans был точно обнаружен данным методом на каждом тестируемом уровне загрязнения (таблица 2), поскольку восстановление флуоресценции варьировалось от 98% до 102%, а восстановление жизнеспособности от 97% до 102%. . Более того, нет статистических различий между Milliflex Quantum и традиционным методом (𝑡-тест Стьюдента для двух выборок; 𝑃≥0.05). Аналогичные результаты были получены с Aspergillus brasiliensis, Escherichia coli, и Bacillus subtilis (данные не показаны).

два тест 𝑃 значение подсчета флуоресценции 9012 901 901 30 907

Микроорганизм Время инкубации Целевая концентрация (КОЕ) Среднее значение подсчета флуоресценции ± стандартное отклонение (КОЕ) Восстановление флуоресценции ± стандартное отклонение (%) Среднее значение подсчета жизнеспособности ± стандартное отклонение (КОЕ) Восстановление жизнеспособности ± стандартное отклонение (%) Два образца Стьюдента значение показателя жизнеспособности

0 0.0 ± 0,0 NA NA 0,0 ± 0,0 NA NA
5 6,2 ± 2,9 102 ± 61 0,93 6,2 ± 2,930 0,93
Candida albicans
ATCC 10231
22 часа 25 24,9 ± 5,4 101 ± 29 0,93 24,2 ± 5,6 50 62.7 ± 10,4 98 ± 22 0,73 62,2 ± 10,1 97 ± 21 0,64
75 102,0 ± 6,3 101 ± 10 0,630 101 ± 9 0,82
100 163,9 ± 15,3
.

Микробиология: обнаружение микробиологического загрязнения

Обнаружение микроорганизмов в пищевых продуктах

Токсичные остатки бактерий в образцах продуктов питания и напитков можно анализировать с помощью наборов для определения бактериальных токсинов. Распространенными форматами тестов для микробного тестирования пищевых продуктов являются ELISA-тесты, ПЦР-тесты в реальном времени, чашки с питательными веществами и чашки с агаром.

Для обнаружения патогенных бактерий доступны иммунологические методы (ИФА). Анализы RIDASCREEN® основаны на технологии «сэндвич», в которой антиген (поверхностный белок бактерии) будет улавливаться в лунке микропланшета и обнаруживаться путем добавления второго антитела, помеченного специальным детекторным ферментом.Иммунологическое обнаружение требует подходящих процедур предварительного обогащения в зависимости от вида болезнетворных бактерий.

Обнаружение бактериальных токсинов возможно непосредственно в образцах пищевых продуктов ( RIDASCREEN® SET Total и RIDASCREEN® SET A, B, C, D, E ) или используется для непрямого обнаружения токсин-продуцирующих патогенных бактерий после соответствующей предварительной -обогащение.

Идентификация патогенных бактерий и вирусов может выполняться с помощью молекулярно-биологических систем, например.грамм. высокоспецифичные наборы для ПЦР в реальном времени линии SureFast® PATHOGEN. Модульная система состоит из оптимизированной подготовки ДНК с помощью колонок с вращающимся фильтром и широко используемой технологии зондов для гидролиза TaqMan, связанных с красителями FAM для обнаружения. Это может быть выполнено со всеми общедоступными типами термоциклов для ПЦР в реальном времени. Внутренний контроль усиления интегрирован во все наборы PLUS. Соответствующий выбор красителя для контроля амплификации зависит от типа циклера, в котором будет проводиться реакция.

RIDASCREEN® SureFast® Compact Dry RIDA®STAMP
Иммунологический тест (ELISA) Молекулярно-биологический тест (ПЦР в реальном времени) Готовые к использованию чашки с питательными веществами Готовые к использованию чашки с агаром
Для обнаружения бактерий и бактериальных токсинов Для обнаружения бактерий и вирусов Подсчет микробов на поверхностях и в разбавленных образцах пищевых продуктов Подсчет микробов на плоских поверхностях и твердых пищевых продуктах
Быстрый и надежный метод Очень специфичный и быстрый; подходит для всех стандартных термоциклеров для ПЦР Простота и безопасность Простота использования и оценки
.

Микробиологическое качество и уровень загрязнения источников воды в округе Исиоло ​​в Кении

Безопасность и безопасность воды имеет жизненно важное значение в засушливых и полузасушливых регионах Кении. Доступность и подача питьевой воды ограничены из-за меняющихся климатических условий и загрязнения окружающей среды, которые снижают качество большинства источников воды. Целью этого исследования было установить пригодность этих источников воды для питья и использования в пищевой промышленности малыми и средними предприятиями (МСП).Целью этого исследования было установить пригодность этих источников воды для питья и использования в пищевой промышленности малыми и средними предприятиями (МСП). В общей сложности 60 проб поверхностных и подземных вод были специально собраны в асептических условиях в четырех административных единицах (Нгаре Мара, LMD, Лепаруа и Вабера) округа Исиоло. ISO 16649-3, 688-2, 7937, 9308-1 и 18744 были использованы для подсчета E.coli, Staphylococcus aureus , Clostridium pafringens , Coliforms и цист.Наивысшее среднее значение Clostridium pafringens в грунтовых и поверхностных водах составило 1452 КОЕ / мл и 3421 КОЕ / мл, соответственно. Среднее значение Staphylococcus aureus составило 740 КОЕ / мл и 1333 КОЕ / мл в поверхностных и грунтовых водах, соответственно. Загрязнение Escherichia coli и Колиформ составило 29,88% и 88,2% соответственно. Количество микробов в источниках воды значительно различается (p≤0,05). Общие колиформные бактерии имели значительную отрицательную взаимосвязь (r = -0.76) с остаточным хлором. Источники подземных и поверхностных вод были сильно загрязнены микроорганизмами до уровней, считающихся небезопасными по стандартам Кении и ВОЗ для питьевой воды. Таким образом, необходима дезинфекция воды в местах потребления.

1. Введение

Вода - важная составляющая жизни каждого человека [1–4]. Водоснабжение и доступность являются целью 6 целей устойчивого развития (ЦУР) и направлены на обеспечение экологической устойчивости [3, 4]. Исторически сложилось так, что усилия по обеспечению доступа к безопасной питьевой воде и воде для пищевой промышленности были сосредоточены на местных источниках воды [5, 6].Большинство регионов развивающихся стран испытывают нехватку питьевой воды, поскольку улучшенные источники воды доступны только в городских районах [7]. Округ Исиоло ​​имеет ограниченные источники воды, включая поверхностные и подземные источники [8, 9]. В стремлении способствовать здоровому образу жизни среди жителей округа, надежный доступ к питьевой воде имеет важное значение для устойчивого развития, здоровья, производства продуктов питания и снижения уровня бедности [4, 10]. Нехватка воды и загрязнение легкодоступных источников воды очевидны во многих регионах развивающихся стран [3, 6, 11].Это во многом объясняется низким уровнем личной гигиены и неадекватными очистными сооружениями для воды и отходов, которые впоследствии являются загрязнителями [12].

Рост населения оказал большее давление на доступные источники воды. Следовательно, более 1,2 миллиарда человек во всем мире не имеют доступа к безопасной воде [13–15]. Ежегодно миллионы людей умирают от диарейных болезней, и большая часть из них - дети в возрасте до 5 лет [16]. Помимо смерти, заболевания, связанные с водой, также мешают людям работать и вести активный образ жизни [17].

Вода подвержена загрязнению микроорганизмами и органическими веществами среди других загрязнителей независимо от источника [3, 11, 18]. Примечательно, что микробные загрязнители, такие как колиформные бактерии, E.coli , Cryptosporidium parvum и Giardia lamblia , ставят под угрозу безопасность воды [19]. Присутствие в воде видов Escherichia coli , Klebsiella, и Enterobacter является вероятным индикатором присутствия патогенных организмов, таких как Clostridium pafringens , Salmonella, и Protozoa [18].Эти патогены вызывают диарею, лямблиоз, дизентерию и гастроэнтерит, что часто встречается у сельских жителей развивающихся стран [2, 3, 8, 20–22].

В графстве Исиоло ​​грунтовые воды преобладают над поверхностными водами и менее подвержены бактериальному загрязнению. Почва и камни, через которые протекают грунтовые воды, задерживают большинство бактерий [23]. Но отсутствие бактериального загрязнения само по себе не означает, что вода пригодна для использования в пищевой промышленности и питьевой воде. Многие невидимые растворенные минеральные и органические компоненты присутствуют в грунтовых водах в различных концентрациях.Большинство из них безвредны или даже полезны; хотя и происходят нечасто, другие вредны, а некоторые могут быть очень токсичными [23]. Необходимо установить степень загрязнения микроорганизмами грунтовых и поверхностных вод, используемых для питья и обработки пищевых продуктов в округе Исиоло. Затем это будет служить критерием для принятия эффективных технологий обеззараживания воды для снабжения жителей питьевой водой и снижения нынешней распространенности заболеваний, передающихся через воду.

2. Материалы и методы
2.1. Условия исследования

Исследование проводилось в округе Исиоло, Кения. Исиоло ​​классифицируется как засушливые и полузасушливые земли (ASAL). Для целей данного исследования точки отбора проб были распределены по четырем административным единицам: Лепаруа, Нгаре Мара, LMD и Вабера, обозначенные кодами 1, 2, 3 и 4 соответственно. Затем источники воды были разделены на подземные, поверхностные и хлорированные городские источники воды. Целенаправленные пробы каждого источника воды были взяты из четырех административных единиц.

2.2. Сбор данных

Изиоло центральный был специально выбран для этого исследования из-за его городского характера с разнообразными источниками воды, а также его доступности по сравнению с другими районами. Целенаправленный отбор проб был использован на основе имеющихся источников воды в центральной части Исиоло. Образцы сначала были закодированы на основе типа источника воды как BH, SW, SPR, R, PAN, TROUGH и RAIN, представляющие собой воду из скважины, мелкого колодца, родника, реки, поддона, желоба и дождевой воды соответственно.Вторая часть кодирования 1, 2, 3 и 4 представляла административные точки выборки в Лепаруа, Нгаре Мара, LMD и Вабера, соответственно. Последняя часть кода образца состояла из букв алфавита для обозначения различных участков отбора проб одного и того же источника воды из одного и того же места административного отбора проб. Таким образом, Bh3F представляет собой код для скважинной воды (BH), отобранной из Нгаре Мара (2), и шестой пробой (участок) скважинной воды из Нгаре Мара (F). Для хлорированной городской воды за TAP следовал числовой номер, который использовался для идентификации, чтобы обозначить количество единиц, поскольку они доступны только в одной административной зоне отбора проб и, таким образом, не требуют административной дифференциации проб.

Отбор проб воды производился по методу APHA [24]. Пробы были доставлены в лабораторию для анализа в течение 48 часов после отбора проб из-за большого расстояния между точками отбора проб и станцией анализа.

2.3. Размер образца

Шестьдесят проб воды были специально отобраны в асептических условиях для анализа из центра Isiolo. Пробы состояли из 35 и 20 проб подземных и поверхностных вод, соответственно, а 5 проб хлорированной городской воды были отобраны в пяти различных точках подключения потребителей.Вторичные данные об общих колиформных бактериях, Escherichia coli и остаточном хлоре для очищенной речной воды и сырой воды Исиоло ​​за период более 6 лет (2011-2016 гг.) Были собраны в компании Isiolo Water and Sewerage Company (IWASCO). Вторичные данные были проанализированы, чтобы установить тенденции качества воды до исследования.

2.4. Аналитические методы
2.4.1. Подсчет Escherichia coli

Подсчет Escherichia coli проводили, как описано в ISO 16649-3 [25].Подсчитывали лиловые колонии на селективной среде, типичной для Escherichia coli .

2.4.2. Подсчет коагулазо-положительных Staphylococcus aureus

Подсчет колоний Staphylococcus aureus в воде подсчитывали, как описано в ISO 6888-2 [26]. Были подсчитаны коагулазоположительные черные колонии на селективных средах, типичных для Staphylococcus aureus .

2.4.3. Подсчет Clostridium pafringens

Подсчет колоний Clostridium pafringens проводили, как описано в ISO 7937 [27].

2.4.4. Определение общего количества колиформ

Подсчет общего количества колиформ проводили, как описано в ISO 9308-1 [28]. Были подсчитаны все типичные розовые колонии на селективных средах.

2.4.5. Подсчет цист

Подсчет цист проводили с использованием методов микроскопии, описанных в ISO 18743: 2015 [29], ISO 18744.2016 [30] для анкилостомы, Cryptosporidium и Giardia lamblia , соответственно. Для подсчета кист амебы использовали микроскопические морфологические характеристики.

2,5. Анализ данных

Дисперсионный анализ (ANOVA) на уровне значимости 5% для сравнения средних значений микробиологического качества воды среди всех отобранных поверхностных, грунтовых и хлорированных городских источников воды с использованием программного обеспечения статистического анализа (SAS) версии 9.0. Наименьшая значимая разница (Lsd) использовалась для разделения средних. Значимые различия обозначены буквами.

Корреляция Пирсона была использована для установления взаимосвязи между микробиологическими аспектами качества отобранной воды, а также вторичными данными с уровнями значимости 5% и 1%.Связь между остаточным хлором, бактериями кишечной палочки и Escherichia coli , полученная из вторичных данных для неочищенных и хлорированных поверхностных вод реки Исиоло ​​из базы данных IWASCO за 6 лет до 2017 года, была проведена на уровне значимости 5%.

3. Результаты
3.1. Среднее количество микробов в подземных, поверхностных и хлорированных городских источниках воды

Среднее количество микробов для Escherichia coli, общих колиформ , Staphylococcus aureus и Clostridium pafringens в грунтовых, поверхностных и хлорированных городских источниках воды для пищи переработка и питье в округе Исиоло ​​показаны в таблице 1.Источниками грунтовых вод являются скважина и неглубокий колодец. Река, родник, дождь, поддон и корыто были источниками поверхностной воды. Пробы хлорированной городской воды отбирались из кранов потребителей IWASCO.

± 5,8 колодец a

Источник воды E.coli (КОЕ / мл) 43 Стафилококк (КОЕ / мл) Клостридий (КОЕ / мл)

Скважина 91 ± 9,16 a 2166 ± 95,24ab 674 ± 18,21a 1368 ± 33,78a
Пружина 35,92 ± 8,89a 4955 ± 29.92abc 8958 ± 29,55b
Водопроводная вода 6,0 ± 0,54 a 2723 ± 56,29abc 308 ± 8,86a 131 ± 13,92a
5185 ± 66.83abc 2183 ± 25.47a 1020 ± 22,16a
Дождь 160,0 ± 14,14b 170 ± 14,14a 2450 ± 12,13a 1500 ± 27.11ab
42139 Река a 2079 ± 48,59ab 448 ± 45,95a 878 ± 16,48a
Желоб 0,0 ± 0,0 a 14012 ± 77,5 ac 1207 ± 15,8126 90,18a
Поддон 6.25 ± 0,75 a 1635 ± 88,21a 8,0 ± 0,57a 1750 ± 26,55ab

(1) Значения представляют собой средние значения более чем 10 определений ± стандартное отклонение.
(2) Значения с одинаковыми буквами в одном столбце существенно не различаются на 5% уровне значимости.

Escherichia coli отсутствовала в лотковой воде. Дождевая вода имела самые высокие средние значения для заражения Escherichia coli - 160 КОЕ / мл.Загрязнение Escherichia coli незначительно (p≤0,05) отличалось среди источников воды, за исключением дождевой воды.

Дождевая вода имела наименьшее среднее количество колиформных бактерий 170 КОЕ / мл, в то время как в неглубокой лунке было наибольшее среднее количество колиформных бактерий 5185 КОЕ / мл. Среднее количество колиформных бактерий во всех источниках воды значительно различается (p≤0,05).

Вода в поддоне имела наименьшее количество Staphylococcus aureus , равное 8 КОЕ / мл, в то время как дождевая вода имела максимальное количество Staphylococcus aureus , равное 2450 КОЕ / мл.Наблюдались незначительные (p≤0,05) различия в среднем количестве Staphylococcus aureus среди источников воды.

Родниковая вода имела самое высокое среднее значение Clostridium pafringens , равное 8177 КОЕ / мл, тогда как хлорированная городская вода имела самое низкое среднее значение Clostridium pafringens , равное 131 КОЕ / мл. Между источниками воды были достоверные различия (p≤0,05).

3.2. Паразитарные цисты в подземных, поверхностных и хлорированных городских источниках воды

Все пробы воды, собранные из поверхностных, грунтовых и хлорированных городских источников воды, были проанализированы на наличие цисты амебы, Giardia lamblia , ооцист Cryptosporidium и нематод.

Родниковая вода содержала одну личинку крючкового червя на миллилитр. Giardia lamblia цисты были обнаружены в открытой воде желоба. В речной воде был один крючок на миллилитр. Как правило, только поверхностные источники воды указывали на заражение паразитарными цистами. Цисты отсутствовали в грунтовых водах и хлорированных городских источниках воды.

3.3. Среднее количество колиформных бактерий, Staphylococcus aureus и Clostridium pafringens в грунтовых водах

Среднее количество Clostridium pafringens , Staphylococcus aureus и количество колиформ в источниках грунтовых вод показано в таблице 2.

12136 400.1 446.5e 8 8 №9d 5j 14 9013 9013 9013

Источники воды Колиформы (КОЕ / мл) 9126 9126 9126 мл) Источник воды Clostridium pafringens (КОЕ / мл)

Bh4F 11 ± 1.4a SW2E 4100 ± 82,8c SW2E 6950 ± 33,6e
SW2E 25 ± 7,1a SW2N 3750 ± 63,6c 3750 ± 63,6c
SW2N 38 ± 3.5a SW2H 10600 ± 84.8f Bh5A 1610 ± 62.2bc
SW2H 52 ± 1.8a Bh Bh 165 ± 49,5a
Bh3G 152 ± 24.7a Bh4C 405 ± 21.2a Bh4E 125 ± 35.4a
Bh5A 180 ± 28.3a SW2L 275 ± 3512.48 Bh138
Bh4C 190 ± 14.4a Bh4D 9 ± 1.4a Bh3C 585 ± 13.4a
Bh4E 245 ± 21128 Bh4E
2500 ± 70,7 кд
SW2L 255 ± 35.4a Bh4B 58 ± 3.5a Bh3B 2800 ± 22.8d
Bh4D 375 ± 35.5a Bh3C SW 9600 ±
Bh3E 380 ± 28.2a SW2B 11 ± 1.5a Bh2A 1065 ± 62.6ab
Bh3A 525 ± 77.8a SW a 200 ± 14,1a
Bh4B 875 ± 13.4ab Bh3D 280 ± 28.2a SW4B 2735 ± 22.3d
Bh3C 1195 ± 27.6abc SW2D 40126 143
SW2B 1350 ± 53.6abcd SW2C 25 ± 7.1a cv 22.2
Bh3B 5a
Bh2A 2200 ± 34.67bcdef SW2F 9500 ± 70.7e
2,86
Bh3D 3000 ± 28,2def Среднее значение 1333
SW2D
Bh4A 3500 ± 70.7f
SW2C 3750 ± 53.6f
Bh2A 7250 ± 49.97g
9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 Bh5C 15250 ± 106,1h
SW2M 23500 ± 121,3i
Среднее 3562

(1) Значения представляют собой средние значения двух определений ± стандартное отклонение
(2) Значения с одинаковыми буквами в одном столбце существенно не различаются на 5% уровне значимости.

Clostridium pafringens отсутствовала в 54,29% проб подземных вод. Bh4E (участок отбора проб 5, вода из скважины LMD) имел самое низкое количество Clostridium pafringens , равное 125 КОЕ / мл, тогда как Bh2A (участок отбора проб 1, скважина Leparua) имел самое высокое среднее значение Clostridium pafringens , равное 16500 КОЕ / мл. Образцы, загрязненные Clostridium pafringens , были в основном из районов административного отбора проб Лепаруа и Нгаре Мара, которые находятся в отдаленных районах вдали от административного города Исиоло.Значительная разница средних значений (p≤0,05) наблюдалась среди Clostridium pafringens из положительных проб грунтовых вод. Bh4F (участок отбора проб 6, вода из скважины LMD) имел самое низкое количество колиформных бактерий - 11 КОЕ / мл, в то время как SW4B (участок отбора проб 4, мелкая вода из колодца Wabera) имел самое высокое среднее количество кишечных бактерий 27500 КОЕ / мл. Колиформные бактерии отсутствовали в 11,8% из 35 проанализированных образцов подземных вод. Среднее количество колиформ значительно различается (p≤0,05) среди образцов подземных вод. Только 11.4% проб грунтовых вод соответствовали кенийскому стандартному требованию об отсутствии колиформ в питьевой воде. Большинство проб подземных вод были загрязнены Staphylococcus aureus . Staphylococcus aureus отсутствовал только в 35,29% источников подземных вод. Bh4D (участок отбора проб 4, вода из скважины LMD) имел самое низкое среднее значение Staphylococcus aureus , равное 9 КОЕ / мл, в то время как SW2H (участок отбора проб 8, неглубокая вода из скважины Нгаре-Мара) имел самое высокое среднее число 10600 КОЕ / мл.Среднее значение Staphylococcus aureus значительно различались (p≤0,05) среди источников грунтовых вод.

3.4. Среднее значение Escherichia coli в источниках грунтовых вод

Среднее значение Escherichia coli в источниках грунтовых вод представлено в таблице 3. Escherichia coli присутствовала только в 22,9% проб грунтовых вод. SW2A имел самое низкое среднее значение Escherichia coli , равное 9 КОЕ / мл, в то время как Bh3A имело самое высокое среднее значение Escherichia coli , равное 205 КОЕ / мл.Среднее значение Escherichia coli значимо (p≤0,05) различается среди источников грунтовых вод.


Образец воды Escherichia coli 34 (КОЕ / мл)
SW2N 12,5 ± 2,1a
Bh4E 14.0 ± 3,6a
Bh4C 17,5 ± 2,8ab
SW2C 35,0 ± 3,9bc
SW4A 50,0 ± 4,7c
Bh3A 205 ± 10,1e

Среднее значение 59,34
Cv

(1) Значения представляют собой средние значения двух определений ± стандартное отклонение
(2) Значения с одинаковыми буквами в одном столбце существенно не различаются при 5% уровне значимости.

3.5. Escherichia coli , Staphylococcus aureus и Clostridium pafringens Загрязнение источников поверхностных вод

Escherichia coli, Clostridium pafringens и Staphylococcus aureus в образцах на поверхности, как показано в таблице , количество поверхностных вод составляет . coli, Staphylococcus aureus и Clostridium pafringens , средние значения значительно различались (p≤0.05) среди положительных проб поверхностных вод. Только 36,8% из 20 проб поверхностных вод дали отрицательный результат на Escherichia coli, Staphylococcus aureus и Clostridium pafringens . R1C имел самое низкое среднее количество Escherichia coli , равное 12 КОЕ / мл, в то время как максимальное количество Escherichia coli составляло 165 КОЕ / мл в R4A. SPR1A имел самое высокое среднее количество Clostridium pafringens , равное 41500 КОЕ / мл, а самое низкое среднее значение Clostridium pafringens составляло 22 КОЕ / мл в SPR1C.Наибольшее среднее количество Staphylococcus aureus составляло 3750 КОЕ / мл для R3A, тогда как наименьшее - 11 КОЕ / мл для R4B.

1,3 ± 1,3 45700 46 9013 9013 Среднее 46 39,2

Образец Escherichia coli ( Cfu14ens
/ мл) Образец Staphylococcus aureus (КОЕ / мл)

R1C 12.0 ± 1,7a SPR1C 22,0 ± 2,3a R4B 11,0 ± 1,4a
PAN2B 12,5 ± 2,9a R3C 38,012 ± 1,5a a
SPR3A 12,5 ± 1,8a R1A 125,0 ± 3,7a SPR1D 22,5 ± 2,3a
SPR1D 13,0 ± 1,66 SPR1D 13,0 ± 1,6a SPR3A 25 ± 3.4a
SPR1B 15,0 ± 1,2a R4B 338,0 ± 10,1a R4A 50,0 ± 4,2a
R3C
R3C SPR1B 95,0 ± 2,5a
SPR1A 40,0 ± 2,5ab R1C 1565,0 ± 40,9a TROUGh3 864,5 ± 3,7b 864,5 ± 3,7b 864,5 ± 3,7b R3A 1850.0 ± 28.2a TROUGh5 1550.0 ± 10.8c
SPR1C 80.0 ± 1.8c PAN2A 3500.0 ± 56.9a SPR3123123126 3500.0 ± 56.9a SPR3123126 ± 5,3d TROUGh3 7026,0 ± 282,4b RAIN2 2450,0 ± 23,7d
RAIN2 160,0 ± 12,5d SPR1B
R4A 165.0 ± 11,3d SPR1A 41500,0 ± 483,7c R3A 3750 ± 70,8e

Среднее Среднее значение 740
CV 23,3 CV 46,1 9014 5

(1) Значения представляют собой средние значения двух определений ± стандартное отклонение
(2) Значения с одинаковыми буквами в одном столбце существенно не различаются на 5% уровне значимости .

3.6. Среднее количество колиформ в поверхностных источниках воды

Среднее количество колиформ в поверхностных источниках воды показано в Таблице 5. Среднее общее количество колиформ значительно различается (p≤0.05) среди поверхностных водных источников. У R1A было самое низкое среднее общее количество колиформ 18 КОЕ / мл, в то время как у Trough3 было самое высокое среднее количество колиформ 27500 КОЕ / мл. Количество колиформ в источниках поверхностной воды было выше рекомендованного минимального предела 0 КОЕ / мл согласно кенийскому стандарту для питьевой воды.

означает стандартные отклонения .
(2) Значения с одинаковыми буквами в одном столбце существенно не различаются на 5% уровне значимости.

16.8ab 4077

Образец Колиформы (КОЕ / мл) Колиформ мл
R1B 18 ± 1.7a SPR1C 975 ± 13.5ab
R4B 28 ± 2.1a SPR3B 1200 ± 11.3ab
R1C
R1C 38 ± 2,8 50A
SPR1B 95 ± 4.6a R4A 4100 ± 15.4bc
SPR1A 110 ± 3.6a R3A 5500 ± 25.69 5500 ± 25.69 9013AN а R3C 5550 ± 110.8c
RAIN2 170 ± 12.5a SPR3A 6350 ± 282.2c
R3B 435 ± 8.9ab SPR1D 9012 536
TROUGh3 27500 ± 83.7e
R1A 605 ± 15.3ab

cv 18 cv 18

два определения
3,7. Escherichia coli , Clostridium pafringens , Coliforms и Staphylococcus aureus Корреляция отсчетов в источниках поверхностных вод

Корреляция между Escherichia coli, Clostridium pafringens, из источников кишечной палочки в поверхностных источниках, а также Coliformures в поверхностных источниках, и показано в источниках стафилококка. Таблица 6.


Staphylococcus aureus

3 Staphylococcus aureus

Coliforms8

Staphylococcus aureus 1 -0,053 0,52 0.472
Колиформы -0,053 1 -0,032 -0,095
Clostridium pafringens 0,52

-0000 coli 0,472 -0,095 -0,018 1

.

Microbiota normal - Wikipedia, la enciclopedia libre

Para otros usos de este término, véase microbiota. Candida albicans , una levadura parte de la microbiota normal.

Нормальная микробиота или микробиома - это конъюнктура микроорганизмов, которая локализована в норме на различных местах жизни многих людей, рассказах о человеческих силах. [1] La Microbiota puede ser Definida Como los microorganismos que son frecuentemente encontrados en varias partes del cuerpo, en Individuals sanos. [2] Нормальная микробиота соответствует нормальному положению симбиотической связи с больным, когда она содержится в отдельном состоянии; estos ayudan en la digestión del alimento, продуцирует витамины и протеины против колонизации отросов микроорганизмов, которые питаются патогенами, lo cual es llamado antagonismo microbiano. [3]

En el cuerpo humano viven aproximadamente 100 billones de microorganismos, los cuales se benefician de nosotros y nosotros de ellos.A pesar de tener más bacterias que células propias, микробиома соло сына 200 граммов aproximadamente de toda la masa del cuerpo humano. Mucha gente ha creído –y sigue creyendo- que las bacterias son malas pero una gran mayoría de elas realizan funciones vitales como la intervención en la expresión de genes y Prevention de enfermedades; es por eso que el microbioma también ha sido llamado «el órgano perdido» y «el genoma extendido». [4]

Microbiota normal humana [редактировать]

В частности, равновесие между сообществами микробов, конформная микробиота желудочно-кишечного тракта и влагалище, важное значение для здоровья человека. [5] Hay pocos parámetros fisiológicos e inmunológicos que no están profundamente afectados por la presencia y naturaleza de la microbiota normal del cuerpo, siendo la resistencia del huésped a las Инфекционные заболевания, распространяющиеся по фактам. [1]

Crecimiento de Escherichia coli .

El término "флора" es erróneo, ya se ha establecido que las bacterias y otros microorganismos no son plantas; sin embargo, se usa para Definir a Los Habitantes Microscópicos en el humano.El termino microbiota has referencia a la comunidad de microorganismos vivos residence en un nicho ecológicoterminado; [6] конформных экосистем microbianos. Los más comunes son los Staphylococcus aureus , Escherichia coli , Candida albicans , algunos de los cuales pueden causar enfermedades en casos especiales, por lo que se les llama patógenos oportunistas. [3] Es de diferenciar que a veces, un microorganismo patógeno está includeido en esta relación, en este caso se refiere al hospedero como portador. [7] Eso es el Concepto.

Человеческая микробиота разделена на категории: [8]

  • Microbiota autóctona: Engloba a aquellos microorganismos que colizan al hospedero durante un tiempo longado, pueden Участник в las funciones fisiológicas y han evolucionado junto a la especie
  • Microbiota alóctona: Она включает в себя микроорганизмов, которые уже были введены в соответствие с культурой среды обитания и в системе культурного образования, которая не вносит никакого вклада в физиологию больницы и имеет скрытые формы.

Así mismo, también se les clasifica por el tiempo de estancia en el hospedero siendo: [8]

  • Скрытая микробиота: Que son los microorganismos que preserva el hospedero durante casi toda la vida, no presentan fluaciones mayores en su población y suelen tener actividad simbiótica con el hospedero.
  • Транзиторная микробиота: Es aquella que presenta флуктуация континуас en su población y suele no ser, незаменимая для supervivencia del hospedero.Entre los cambios que afectan la Colonización por estos microorganismos se encuentran: el cambio de hábitat, la edad, la estación del año, el uso de antibióticos и т. Д.

Composición de la microbiota [editar]

En un animal sano, los tejidos internos, por ejemplo, sangre, cerebro и т. Д .; normalmente están libres de microorganismos. Sin embargo, los tejidos superficiales (piel y lasmbranas mucosas) están constantemente en contacto con organos del medio ambiente y son fácilmente columnsados ​​por especies de microbios Diferentes. [9] Нормальная микробиота - это конституция для множества бактерий, хонго, простейших и других микробов, отдельная микробиота кишечника, составляющая человека и комплексная экосистема, интегрированная по массе 400 видов бактерий. [5] Asimismo, se localiza en ambientes específicos en el humano como son: piel, orofaringe, tracto gastrointestinal y genitourinario, entre otros. [1] La población de microorganismos que convive en contacto directo con el hombre excede al número de células corporales del ser humano en una relación de 10: 1 (por cada célula humana hay 10 microbios) Tomando en cuenta que el cuerpo humano Se compone de aproximadamente 10 13 el organismo humano lleva consigo a 10 14 células no propias. [8] En el кишечник grueso de mamíferos, que es donde residence la mayor parte de esta microbiota, la cifra de microorganismos se eleva a 10 12 -10 14 (эквивалент приблизительно 1-1,5 кг en peso), incluso superior a la encontrada muchas veces en el suelo, subsuelo y los océanos. [6] En 2008, el número total de especies bacterianas, del tracto Gastrointestinal Fue Extendedido a 40 000 [10]

Origen de la microbiota normal [редактировать]

El feto es estéril hasta que rompe lambrana en la que se encuentra.En su salida el bebé es expuesto a la естественная флора генитального тракта де ла мадре (en este momento también es posible la infcción de ciertas enfermedades de transmisión madre-hijo), [8] junto a las bacterias en el ambiente, incluso a las inclusive en la respración que pueda poner cualquier persona cerca del bebé. Con los días, la флора empieza a esparcirse según su раскрытие организма, ya que no hay Compettidores, el infante está expuesto a un alto rango de organos, y los que mejor se adapten a cada sitio, serán los преобладающие. [2] Así por ejemplo, los cocos grampositivos aerobios prefieren la piel y los coliformes el Кишечник.

Mientras el feto humano se desarrolla en un ambiente estéril, el neonato se ve expuesto a microorganismos del medio ambiente y el tracto genital de su madre, en este momento también esposible la infcción de ciertas enfermedades de transmisión madre-medre reportado contagios del virus del papiloma humano de esta manera. [11] Lo primero que secoliza es la piel del recién nacido, seguida de la bucofaringe, el aparato digestivo y otras mucosas. [3] Лас-бактерии, которые являются комиензанами, колонизируют пищеваренный тракт-дель-лактанте, сыгранный на продуктах ácido láctico provientes de la leche materna.

No obstante, según su posición en el cuerpo, es la complejidad predcir qué microorganismos hazabitarán el lugar, ya que algunas partes del cuerpo no son muy afectadas o no son nada afectadas por el medio externo y el estilo de vida. Los Menos Compleja puede ser la todo lo externo: piel, ojos, oídos, cuero cabelludo, axilas; un nivel intermedio vendrían a ser las fosas nasales, tráquea, laringe, y bronquios.En el nivel más complejo están el tracto желудочно-кишечного, букального и вагинального. [12] Al final, lo más вероятно, es que su u ukraine, la misma que sus padres, personas de su misma edad y cultura. En la mayoría de los casos, después de algunos meses del nacimiento, la Representación de especies microbianas en la flor neonatal es muy similar al patrón de colización en el vulto. [13]

Microbiota de la leche humana. [Editar]

Comparación entre la leche humana.Leche del Principio (izq) и leche del final (дер).

La leche materna es una fuente importante de bacterias comensales, мутуалистические пробиотики для инфантильных кишечников. Entre las bacterias preominantes destacan diversas especies de estafilococos, estreptococos y lactobacilos. Содержание микроорганизмов в материнской лече-нии сокращается и является явным доказательством состояния кишечной микробиоты, содержащей лактанты, которые несут в себе различные виды пищи. [14]

Colonización [editar]

La Colonización es el processso mediante el cual los microorganismos se instalan en unterminado sitio, e inmediatamente después del nacimiento.Esta puede ser por un breve periodo de tiempo (horas o días) o de forma permanente. La Colonización Nunca Afecta Las Funciones Normales del Organismo hospedero y Participan varios factores como el tipo de alimentación recibida y el grado de Exposición al medio ambiente. [1] [3]

La Colonización tiene a su cargo una especificidad de tejido, las bacterias escogen donde quieren vivir . A la preferencia bacteriana por un sitioterminado se le llama Tropismo tisular . [9] [8] Una explicación para el tropismo tisular es que el hospedero proporciona los нутриенты esenciales y factores de crecimiento para la бактерии, además de oxígeno, Potencial de Oxidorreducción el pH adecuado y el la temperatur así como ácidos grasos, lisozima, acidez del jugo gástrico / orina [15] para su control y distribución de entre sus microecosistemas . La mayoría de las bacterias pueden Colonizar un tejido específico, ya que pueden adherirse al tejido o el sitio de una manera específica que impla Interacciones químicas complementarias entre las dos superficies, un efecto conocido como Específicís.Esta Involucra Interacciones bioquímicas entre los components de la superficie bacteriana (ligandos o adhesinas) и рецепторы huésped молекулярной целюлы. Los Companentes de bacterianos que proporcionan adhesinas son parte молекулярные de sus cápsulas, fimbrias, o las paredes celulares. Los Receptores de las células o tejidos humanos suelen ser moléculas de glucoproteína se encuentra en la célula huésped o de la superficie del tejido. Бактерии Algunas производят биопеликулы на поверхности тканей.Estas bacterias производят polímeros que allowen la adherencia de otras bacterias a esta superficie. Un ejemplo de esta es la formación de placa bacteriana [9]

La Colonización y el establecimiento de la microbiota normal es un processsocontino que ocurre durante toda la vida de un Individualsano, de tal manera que la флора, де un recién nacido será Diferente a la de un Adalto o un anciano, esto puede explicarse mediante el cambio en la diea, hábitos, vida sex, niveles гормональные, entre otros. [8]

Función de la microbiota [редактор]

Вклад микробиоты кишечника в состояние здоровья человека, функции защиты, дезинфекции и пролиферации клетчатки и иммуномодуляции. Скорость колонизации и тип микроорганизмов, которая колонизируется с большим воздействием на иммунную систему, регулируется проницаемостью и нарушением равновесия кишечника и обнаруживает возбудимость микроорганизмов, как инфекция, обнаруживаемая с определением чувствительности. de la sensibilidad a los antígenos o alérgenos de la diea. [5]

El tracto Gastrointestinal Structituye Una de las Principales zonas de contacto con microorganismos Potencialmente nocivos como bacterias y virus así como de toxinas y otros alérgenos y la mucosa forma la primera barrera frente a ellos y desemórena de la desemóña de una frente a ellos y desemóñón de una frente a ellos y desemóñón de la frente a ellos y desemórena de la frente a ellos y desemórena de la frente эстос. Su función protectora de зависимые от компонентов estructurales y funcionales de la слизистой оболочки кишечника, иммунной системы и взаимодействия с микробиотой кишечника. [5]

Los patógenos normalmente alteran la permeabilidad кишечника, mientras que las bacterias comensales beneficiosas y los probióticos pueden contribuir al restablecimiento de esta y de las uniones intercelulares, y favorecer la proliferación celular. La síntesis de defensinas y Proteasas impladas en su activación en las células de Paneth son moduladas por la микробиота кишечника и algunas bacterias probióticas. [5]

Microbiota cutánea [редактировать]

Existe un gran número de microorganismos cutáneos, aunque este ambiente es hostil и не благоприятен для супервизии мэрии элос [3] debido a la presencia de enzimas como la psoriasina. [15]

Лос-организмов, которые несут в себе encontrado en la piel son en su mayoría bacterias gram positivas, por ejemplo, estafilococos coagulasa-negativos, Staphylococcus aureus , corynebacterium, Propionibacteriaceae. Organismos como Clostridium perfringens , Cándida, Malassezia furfur se pueden hallar en localizaciones húmedas. [3] También es posible encontrar parásitos del tipo Demodex_folliculorum, rodeando los folículos pilosos. [16]

La microbiota varía según las condiciones que impla cada región del cuerpo, de esta forma se pueden dividir en tres grupos:

  • La axila, perineo, y entre los dedos del pie
  • Мано, торс
  • Brazos y piernas

Los Primeros, al ser áreas más cerradas, retienen más calor y líquidos corporales. Áreas de este tipo son colonizadas más que todo por bacilos gram negativos que las áreas que son más secas pero no pueden columnsar de manera permanente debido a que no son capaces de sobrevivir a ambientes secos (con excepción de 000 3 Acin.) La mayoría de los microorganismos viven en el estrato córneo de la piel y en la parte más externa de los folículos del cabello.Sin embargo, hay bacterias que se mantienen en lo más interno de los folículos y no son alcanzados por desinfectantes; estas bacterias son las que vuelven a poblar el área luego de que las de la superficie han sido excluadas. [17]

Una zona que mece especial atención es el Concordo Auditivo externo y la oreja, donde se encuentran estafilococos coagulasanegativos y algunos patógenos Potenciales como Streptococcus pneumoniae , Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa . [3] Эста флора кобра важна в разорванной мембране тимпаника, есть организм в организме, питающийся средним заболеванием и причинным инфекционным заболеванием.

Биота кишечная [редактор]

Микробиота кишечника включает виды естественных, постоянных колонизаторов желудочно-кишечного тракта (эстомаго) и серию переменных микроорганизмов, живущих в организме, которые проходят через транзиторные клетки в кишечнике. Las bacterias nativas se adquieren al nacer y durante el primer año de vida, mientras que las bacterias en tránsito se adquieren continamente a través de los alimentos. [6]

En un vulto la puede puede pesar микробиоты 1,5 килограмма портермино меди и есть конституция пор ун численность микроорганизмов que, según autores, se encuentra entre 10 и 100 миллиардов. [18]

Биота вагинальная [редакция]

La biota bacteriana de la vagina puede tener un profundo impacto en la salud de las mujeres y sus recién nacidos. La vagina es un ecosistema dinámico que permanentemente regula su equilibrio mediante el estado гормональный грипп и присутствующая бактериальная флора.Se constituye de especies de Lactobacillus (96%) y bacterias aerodinámicas Potencialmente patógenas (4% restante), como Staphylococcus aureus , Streptococcus grupo B y Escherichia coli 9000.

Микробиота орального [редактора]

Esta es de las biotas más complejas y heterogéneas en el cuerpo, la presencia de piezas dentales lo hacen aún más Diferente. [12] La bucal puede verse alterada con la llegada de diversas bacterias oportunistas.La sucesión bacteriana va incorporatedrando grupos o complejos microbianos y modifica sus características. Se denomina placa bacteriana a la masa de microorganismos que en una compleja organación se adhieren a los dientes integrationndo colonia denominados biofilm. Desde el punto de vista patogénico, existe un biofilm cariogénico, que al метаболизар лос азукарес де ла диета, производит ácidos orgánicos que desmineralizan la superficie dental y se forma la caries. Эль-фенотип биопленки является характерным для периодонтопатогенных микроорганизмов, которые содержат данные о других факторах, вызывающих гингивит или периодонтит. [19]

Микробиота окулярная [редактор]

La biota que Habita la consuntiva es en mayoría la misma de la piel. Las lágrimas contienen la enzima lisozima que ayuda a mantener limitado el crecimiento bacterial. [7] Улучшенная глазная колония с отрицательными бактериями, вызывающими коагулус и водоросли, ассоциированные с микроорганизмами, в том числе Haemophilus , Neisseria . [3]

Los organisos causales de enfermedades oculares, como конъюнтивит, сын Streptococcus pneumoniae , Staphylococcus aureus , Haemophilus influenzae , Neisseria gonorrhoeae , , Neisseria gonorrhoeae , [3]

Microbiota biliar [редактор]

La microbiota biliar es una microestructura bacteriana normal del tracto biliar que es resistente a los efectos agresivos de la bilis.Las funciones naturales de la microbiota biliar en el cuerpo son mantener el estado inmunológico normal de los colangiocitos y proteger los кондуктивность biliares против ла колонизацией экзогенных микроорганизмов, которые обитают в través del esfínter de Oddi desde el duodeno. [20] Las alteraciones de la composición normal de la microbiota biliar pueden causar el desarrollo de enfermedades del tracto biliar: colangiopatías. [21]

Probióticos [редактор]

El uso de probióticos es una alternativa cada vez más empleada для регулярного восстановления и восстановления бактериальной микробиоты, нормальной профилактической, терапевтической и нутрициональной. [1] La OMS y la FAO определяет пробиотикос комо «живые микроорганизмы, без патогенов, вызывающих администрацию в кантидадес адкуадас, не имеющую благотворного отношения к здоровью человека и физиологии». [22] Los lactobacilos constituyen una parte integral de la microecología желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы и человека и является активным участником нормальной регуляции биоты. Por lo que la propuesta de aumentar las defensas microbianas comensales del huésped, usando organos probióticos, tiene conscuencias tan buenas para el кишечник como para la vagina. [1]

Al género Bifidobacterium se le atribuye una important función en el mantenimiento del equilibrio del ecosistema кишечник и desplazamiento de microorganismos patógenos. Las cepas de este género constituyen el grupo преобладающе де ла фекальной микробиоты niños alimentados con leche materna y constituyen a uno de los probióticos más importantes. [5]

Ente las ventajas que se han encontrado a los probióticos se inclyen: [23]

Todas estas ventajas no constituyen un daño para el hospedero.

Véase también [редактор]

Библиография [редактор]

  • Патрик Р. Мюррей; Кен С. Розенталь; Майкл А. Пфаллер (апрель 2009 г.). «Capítulo 7: Flora microbiana comensal y patógena en el ser humano». Эн Патрик Р. Мюррей, изд. Microbiología Médica (6a edición). Испания: Эльзевье-Мосби. С. 73-76. ISBN 978-84-8086-465-7 . OCLC 733761359 . Consultado el 31 de marzo de 2012.
  • Brooks, Geo. F .; Кэрролл, Карен С.; Butel, Janet S .; Морс, Стивен А .; Мицнер, Тимоти А. (2011). «Capítulo 10: Microflora normal del cuerpo humano». En Jawetz, изд. Jawetz, Melnick y Adelberg Microbiología médica . Хосе Рафаэль Бленджио Пинто (переводчик) (издание 25a). Estados Unidos: McGraw-Hill-Lange. С. 159-164. ISBN 978-607-15-0503-3 . OCLC 757476276 . Edición inglesa: ISBN 978-0-07-162496-1 .
  • Кумате, Хесус; Гутьеррес, Гонсало; Муньос, Онофре; Сантос, Игнасио; Солорзано Фонтино; Миранда Гваделупе (2008).«Capítulo 2: Микробиота нормальная». Infectología Clínica Kumate-Gutiérrez (17a edición). Мексика: Méndez Editores (опубликовано в 2009 г.). С. 13-21. ISBN 968-5328-77-3 . OCLC 728653050 .

Ссылки [редактор]

  1. a b c d e e 9000 Минерва Паола Барриос Себальос; Лидия Патрисия Карденас де ла Пенья; Фернандо Анайя Веласкес; Фелипе Падилья Вака (сентябрь 2005 г.).«Флора Нормальная, Пробиотикос и Салуд Хумана» (PDF). Acta Universitaria. Университет Гуанахуато (Гуанахуато, Мексика) 15 (33): 34-40. ISSN 0188-6266 . Archivado desde el original el fecha desconocida. Consultado el 28 de diciembre de 2011.
  2. a b Кеннет Райан и др. «Микробиология Sherris Medical - Введение в инфекционные заболевания», 4-е издание, Эдиториал McGraw-Hill Medical, 2003.ISBN 0-83-858529-9
  3. а b c d e 9000 9000 h i j Патрик Р. Мюррей; Кен С.Розенталь; Майкл А. Пфаллер (апрель 2009 г.). «Flora microbiana comensal y patógena en el ser humano». Эн Патрик Р. Мюррей, изд. Microbiología Médica . 6 Эд (6a edición). Испания: Эльзевье-Мосби. С. 73-76. ISBN 978-84-8086-465-7 .
  4. ↑ Коронель, Роберто И. Рамирес Гарсия / Хосе Мануэль Сеговия. «El microbioma humano - Revista ¿Cómo ves? - Генеральный Директор Дивульгасион де ла Сенсия де ла УНАМ ». www.comoves.unam.mx . Consultado el 18 de noviembre de 2016.
  5. a b c d e e z 000 M.C. Колладо; J. Dalmau (февраль 2006 г.). «Вклад кишечной микробиоты и генетической« Bifidobacterium »в механизмы защиты желудочно-кишечного тракта» (PDF). Acta Pedr Esp (España: Ediciones Mayo) 64 (2): 74-78. ISSN 2014-2986 . Archivado desde el original el 5 de septiembre de 2011. Consultado el 14 de seno de 2012.
  6. a b c Владимир Руис Альварес; Ямила Пуиг Пенья; Мирейда Родригес Акоста (Хулио де 2010). «Микробиота кишечника, система иммунного и иммунного ответа» (PDF). Revista cubana devestigaciones biomédicas 29 (3): 364-397. ISSN 0864-0300 . Archivado desde el original el 28 de noviembre de 2011. Consultado el 29-12-11.
  7. a b Ричард А. и др. «Иллюстрированные обзоры Липпинкотта: микробиология» 2 ° Edición, Эдиториал Липпинкотт Уильямс и Уилкинс, 2006 г. ISBN 0781782155 ISBN 9780781782
  8. a b c d e 9000ate 9000 Гутьеррес, Гонсало; Муньос, Онофре; Сантос, Игнасио; Солорзано Фонтино; Миранда Гваделупе (2008).«Capítulo 2: Microbiota Normal». Infectología Clínica Kumate-Gutiérrez (17a edición). Мексика: Méndez Editores (опубликовано в 2009 г.). С. 13-21. ISBN 968-5328-77-3 . «Sección A: Principios Generales, I. Relación huésped-parásito».
  9. a b c d Kenneth Todar. «Нормальная бактериальная флора человека». Интернет-учебник бактериологии Тодара (английский язык). Консультируйтесь с 28 декабря 2011 года. «Sitio web que contiene muchas ilustraciones útiles».
  10. ↑ Франк Д. Н.; Pace NR. «Желудочно-кишечная микробиология вступает в эру метагеномики». (pdf). Curr Opin Gastroenterol (en inglés) (Oxford) 24 (1): 4-10. ISSN 1531-7056 . PMID 18043225 . DOI: 10.1097 / MOG.0b013e3282f2b0e8 . Consultado el 29-12-11. (Requiere suscripción).
  11. ↑ Fredericks, BD; Балкин А; Дэниел, HW; Schonrock, J; Уорд, Б; Frazer, IH (февраль 1993 г.). «Передача вирусов папилломы человека от матери к ребенку» [Transmisión del virus del papiloma humano de madre a hijo] (PDF). Австралийский и новозеландский журнал акушерства и гинекологии (en inglés) (Австралия) 33 (1): 30-32. ISSN 0004-8666 . PMID 8388683 . DOI: 10.1111 / j.1479-828X.1993.tb02047.x . Consultado el 28-12-11.(Requiere suscripción).
  12. a b Хуан Басуальдо и др. «Microbiología Biomédica» 2 ° Edición, Эдиториал Атланте, 2006. ISBN 9789509539471
  13. ↑ Mackowiak, PA (Хулио де 1982). «Нормальная микробная флора». [La нормальная микрофлора]. Медицинский журнал Новой Англии (en inglés) (Estados Unidos) 307 (2): 83-93. ISSN 1533-4406 . PMID 6806656 . DOI: 10.1056 / NEJM198207083070203 . Consultado el 28-12-11. (Requiere suscripción).
  14. ↑ J.M. Rodríguez; Э. Хименес; В. Мерино; А. Мальдонадо; М.Л. Марин; Л. Фернандес; Р. Мартин (февраль 2008 г.). «Microbiota de la leche humanaen condiciones fisiológicas» (PDF). Acta Pediatr Esp 66 (2): 77-82. Архив от 5 сентября 2011 года. Обратитесь к 28 декабря 2011 года.
  15. a b Янис Куби; Томас Дж.Киндт; Ричард А. Голдсби; Барбара А. Осборн (май 2007 г.). «Инмунидад инната». Escrito en Estados unidos. Эн Томас Дж. Киндт, изд. Inmunología de Kuby (6a edición). Мексика: межамериканский McGraw-Hill. С. 52-75. ISBN 978-970-10-6454-2 .
  16. ↑ Santamaría GV y col. Flora cutánea como protección y barrera de la piel normal. Rev Cent Dermatol Pascua. Vol. 11, Núm. 1 • Эне-Абр 2002
  17. ↑ Самуэль Барон и др. «Медицинская микробиология», 4-е издание. Медицинский филиал Техасского университета в Галвестоне; 1996 г.ISBN 0-9631172-1-1
  18. ↑ Самудио-Васкес В.П .; Ramírez-Mayans J.A .; Toro-Monjaraz E.M .; Сервантес-Бустаманте Р .; Сарате-Мондрагон Ф .; Montijo-Barrios E .; Кадена-Леон Х.Ф .; Казарес-Мендес Х.М. (2017). «Важная информация о микробиоте желудочно-кишечного тракта в педиатрии». Acta pediatr. Méx (Revisión) (Мексика: SciELO) 38 (1). Consultado el 12 de julio de 2019.
  19. ↑ Зерон Агустин. Biofilm Microbiano, Nuevas perspectiva en el control de placa bacteriana. Ред.Odontología Actual • Año IV. № 43 Diciembre (2006)
  20. ↑ Nicoletti, A .; Ponziani, F.R .; Nardella, E .; Ianiro, G .; Gasbarrini, A .; Зилери Даль Верме, Л. (2020-03). «Микробиота желчевыводящих путей: новый ребенок на блоке болезней печени?». Европейский обзор медицинских и фармакологических наук 24 (5): 2750-2775. ISSN 1128-3602 . DOI: 10.26355 / eurrev_202003_20548 . Consultado el 24 de octubre de 2020.
  21. ↑ Клабуков, И. Д .; Люндуп, А.V .; Дюжева Т.Г .; Тяхт, А. В. (2017). «Желчная микробиота и заболевания желчных протоков». Вестн. Росс. Акад. Med. НАУК 72 (3): 172-179. ISSN 2414-3545 . DOI: 10.15690 / vramn787 . Consultado el 24 de octubre de 2020.
  22. ↑ FAO / OMS (2011). «Пробиотики» [Probióticos] (HTML). Estados Unidos. Архив от 31 декабря 2011 года. Обратитесь к 29 декабря 2011 года. (Requiere suscripción). «Официальная страница ФАО».
  23. ↑ Otles, S; Чагинди, О; Акчичек Э.(назад в 2003 г.). «Пробиотики и здоровье» (PDF). Азиатско-Тихоокеанский журнал профилактики рака (английский язык) 4 (4): 369-372. Archivado desde el original el 16 de mayo de 2008. Consultado el 29-12-11.

Enlaces externos [редактировать]

.

Смотрите также

Свежие записи
Июнь 2018
Пн Вт Ср Чт Пт Сб Вс
« Авг    
 123
45678910
11121314151617
18192021222324
252627282930